Mastzellentheorie ist in das erste Bild eingetragen.
Die Giemsa-Färbung ist spezifisches geeignet für Mastzellen.
Protokoll:
- Schnitte in Wasser bringen;
- verdünnter Giemsa (empirisch feststellen) aufbringen und 2 bis 3 Minuten färben;
- kurz spulen mit AD;
- 2min Ethanol 70% (Farbwolken gehen ab);
- 3min Isopropanol 100%;
- 3min Frische Isopropanol 100%;
- einschließen in Euparal
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures001/23207_1858017.jpg)
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures001/23207_16501917.jpg)
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures001/23207_4388769.jpg)
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Das Colon (Dickdarm) sieht makroskopisch aus wie im ersten Bild.
In die hier gezeigte Schnitte sind die Zotten Krypten sowohl Flach als auch Quer getroffen.
Die "von Gieson" Färbung ist ein Typischer übersichtsfärbung. Das Haematoxyline färbt die Kerne und das Picrofuchsin färbt Bindegewebe Rosa an.
Protokoll:
- Schnitte in Wasser bringen;
- Eisenhaematoxyline von Weigert A und B kurz für die Färbung mischen 1:1;
- 5min Färben;
- Spulen mit AD;
- kurz einbringen in Salzsaure Ethanol (5sec);
- 15min Blauen in Kalkreiches Wasser;
- Spulen mit AD;
- 3min Färben mit Picrofuchsin (von Gieson gemisch);
- Spulen mit AD;
- 2min Ethanol 70% (Farbwolken gehen ab);
- 3min Isopropanol 100%;
- 3min Frische Isopropanol 100%;
- einschließen in Euparal
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures001/23207_63276897.jpg)
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures001/23207_28888095.jpg)
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures001/23207_24895872.jpg)
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures001/23207_46572432.jpg)
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures001/23207_15384696.jpg)
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures001/23207_21222684.jpg)
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures001/23207_15496694.jpg)
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures001/23207_26262615.jpg)
Viel spass beim anschauen und schöne grusse aus die Niederlanden
Ronald
Lieber Ronald,
wieder sehr schöne Fotos! Das letzte Mastzellen-Bild hat aber irgendein Problem (Aperturblende zu weit geschlossen? ISO zu grob eingestellt?).
Eine Korrektur: Das Colon hat keine Zotten, die gibt es nur im Dünndarm. Im Colon gibt es lediglich Krypten, die auch gut auf Deinen Fotos erkennbar sind. Ferner hast Du da eine größere Schleimhautfalte mit erfasst.
Dündarm mit Zotten sieht so aus:
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures001/23210_40967001.jpg)
AZAN, Zeiss Plan Neofluar 10x
Die Van Gieson-Färbung sieht ganz anders aus, als ich es gewohnt bin. Eigentlich werden die Kerne doch sehr dunkel, fast schwarz und nicht blau, die Kollagenfasern leuchtend rot und nicht violett und das Zytoplasma der Enterozyten rötlich bis gelblich und nicht farblos. Wie lange hast Du nach dem Färben gespült?
So sieht die Elastica-Van Gieson-Färbung bei mir aus (also mit zusätzlich schwarz gefärbten elastischen Fasern):
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures001/23210_31575752.jpg)
Vaskulitis, Zeiss Plan Neofluar 20x
Herzliche Grüße,
Florian
Florian,
Die Zotten-fehler herschreibe ich morgen.
Das Protokoll habe ich beschrieben. Bei mir färben sich nur die Erythrocyten Gelb an (den Romeis muss ich also wirklich mal bekommen).
Wie sieht dein 'von Gieson' Protokoll denn aus?
Gute Nacht, Ronald
Hallo Ronald,
auf die Schnelle - also ohne noch einmal in den Romeis zu blicken:
Ich mache eigentlich alles so wie Du, ich spüle aber extrem kurz, sodass der Schnitt makroskopisch rot bleibt, dann schnell 70er und gleich in 100er Alkohol.
Gute Nacht,
Florian
Florian,
Der Text "Zotten" ist geändert in "Krypten". Dafür dank, du bist ja auch ein echte Spezialist und das ist auch gut (immer scharf bleiben und kein Unsinn verkaufen).
Bin gespannt wie lange du mit Ethanol spülst? In meine 70% Gang gehen viele Färbwolken ab aber ich denke immer das alle Wasser durch Ethanol versetzt werden muss
und dann ist 2min doch wohl notwendig oder?.
Was beim HE Färbung hilft ist das ansauern von Eosin mit etwas 2% Eisessig. Da hält das Eosin viel besser.
Vielleicht muss ich das auch mal machen. Mein Romeis ist bestellt aber kann jemand vielleicht mal nachschauen was hier die Lösung sein kann?
Grüße Ronald
Hallo Ronald,
im Romeis (17. Aufl.) wird folgendes für die Van-Gieson-Färbung beschrieben:
Nach 1 min. Pikrofuchsin wird der Schnitt mit Filterpapier abgetupft und dann sofort in 96% Alkohol überführt bis keine Farbwolken mehr abgehen. Danach weiter in 100% Isopropanol, Xylol und Eindecken.
Also sollte auf keine Fall mit Aqua dest. gespült werden, wie ich bereits sagte. Dies löst die Pikrinsäure vollständig aus dem Präparat.
Herzliche Grüße,
Florian
Hallo Leute
Wunderschönde Bilder.
Die Bilder des Darmes sind auch von der Maus?
Welche Art der Vasulitis sieht man in den Beispielbildern von Florian. Die elastischen Fasern sind zerstört, keine Granulos denke an eine A. temporalis?? Würde mich als Rheumaologen sehr interessieren, da man selten Bilder einer floriden Vasculitis zu sehen bekommt.
Beste Grüße
Wasilis
Hallo Wasilis,
die Frage nach der Vaskulitis habe ich befürchtet. Also: Du siehst Gefäße der Oberschenkelmuskulatur eines Patienten mit Hepatitis C. Diese litt unter einer kryoglobulinämischen Vaskulitis, die bei Hep C gehäuft auftritt.
Darf ich Dich für weiteres auf die einschlägige Fachliteratur verweisen?
Der AZAN-Dündarm ist vom Menschen.
Herzliche Grüße,
Florian
Florian,
Danke für die such Arbeit (mein 18e Romeis habe ich bestellt und gesternabend ein altes 15e Druck auf ebay erworben).
Jetzt seht die Sache anders aus. Ich habe noch ein paar Sternumschnitte und werde heuteabend die von Gieson Färbung erneut ausfuhren.
Wie seht das Dritte Bild jetzt aus? Besser kann ich es mit ein 40x nicht bekommen. Ich suche mich ein 63x Objektiv.
Grüße Ronald
Wasilis,
Die Colon Krypten Schnitte sind nicht von eine Maus sondern ein Schwein.
Grüße Ronald
Lieber Ronald,
so ganz ist der Abbildungsfehler beim 40er Fluotar nicht verschwunden. Ich glaube aber, dass das an der Kamera liegt. Damit kenne ich mich aber nicht so gut aus. Fest steht, dass der Schnitt exzellent ist, das Objektiv sicherlich ein exquisites Bild liefert und Du ein sehr guter Mikroskopiker bist. Da fällt mir eben nur die Kamera ein. Vielleicht weiß einer der Experten Rat? Welche Ausrüstung hattest Du noch mal?
Herzliche Grüße,
Florian
Florian,
Ich fotografiere mit ein Coolpix 4500 und ein Leitz periplan 10x kamera-adapter.
Ronald
Hallo nochmal
Hab gestern einen Artikel in Nature rewiews immunology gelesen da stand "The human intestinal mucosa is composed of a simple layer of columnar epithelial cells, as well as the underlying lamina propria and muscular mucosa. Goblet cells, which synthesize and release mucin, as well as other differentiated epithelial cell types, are present. The unstirred layer, which cannot be seen histologically, is located immediately above the epithelial cells. "
Mit unstirred layer ist doch der Mucinfilm gemeint den du so schön angefärbt hast oder?? Und den kann man histologisch auch sehr schön sehen. Müssen wir nun Nature korrigieren? oder ich hab gerade einschwarzes Loch im Hirn
Beste Grüße
Wasilis
Hallo Wasilis,
ZitatMüssen wir nun Nature korrigieren? oder ich hab gerade einschwarzes Loch im Hirn
ich glaube das schwarze Loch war eher bei den Reviewern des Artikels.
Beste Grüße !
JB
Hallo Wasilis,
das verstehe ich auch nicht. Meinen die vielleicht etwas ganz anderes? Muzin jedenfalls ist sehr gut nachweisbar und wird von uns in der Routinediagnostik täglich zig mal untersucht.
Hier mal ein Beispiel: Becherzellen, diesmal nicht im Darm sondern in einem Bronchialast, wo sie z.B. im Rahmen einer chronischen Bronchitis vermehrt sind. Muzin/saure Mukupolysaccharide/Glykogen lassen sich gut mit der PAS-Färbung (Perjodsäre-Schiff-Reaktion) nachweisen, sie sind dann leuchtend rot:
1. Leicht vermehrte Becherzellen, eigentlich beinahe ein Normalbefund:
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures001/23456_21591094.jpg)
PAS, Zeiss Plan Neofluar 40x
2. Vermehrte Becherzellen bei leichter chronischer Bronchitis:
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures001/23456_32075139.jpg)
PAS, Zeiss Planapochromat 63x
3.Stark vermehrte Becherzellen bei schwerer chronischer Bronchitis:
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures001/23456_34095139.jpg)
PAS, Zeiss Plan Neofluar 40x
Alles sehr schleimig im Abgang!
Florian
Hallo nochmal,
kann es sein, dass die die Glykokalix meinen?
Florian
Hallo
Bei den Bildern von Florian ist die Schleimschicht aber nicht mir Giemsa blau gefärbt und der Schleim eigentlich unsichtbar. Vielleicht ist das nicht so bekannt??
Beste Grüße und sendet mehr Histologien (Ich hoffe dass ich auch bald soweit bin)
Schöne Grüße
Wasilis
Hallo Wasilis,
vielleicht hätte ich es explizit dazu schreiben sollen: Der Schleim ist auf meinen Bildern leuchtend rot, sowohl in den Becherzellen als auch der Schleimhaut aufgelagert - das ist dann das Sputum, das Raucher morgens so gerne aushusten!
Jetzt alles klar?
Expektorierende Grüße,
Florian
P.S.: Ich bin mir mittlerweile sicher, dass in dem Paper die Glykokalix gemeint ist - die kann man wirklich nur im EM sehen und wohl nie im Lichtmikroskop.
Hallo!
Nach so viel Darm möchte ich jetzt noch eine Erkrankung des Darms (hier Duodenum) hinterherschicken. Es handelt sich um Lambliasis, einen Befall des Dünndarms mit Parasiten (Giardia lamblia).
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures001/23600_43890719.jpg)
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures001/23600_28925319.jpg)
Kamera: Canon Ixus 500
Mikroskop: Zeiss Photomikroskop III
Bei Lambliasis kann es zu Durchfall, Blähungen und Gewichtsabnahme kommen, oft verläuft die Erkrankung jedoch auch asymptomatisch.
Liebe Grüße,
Harald
Herald,
Danke für dein Beitrag. Ist gut zu vernehmen das doch noch so viele Histologie Freunde da sind.
Bei uns in Holland sind nur wenige damit beschäftigt.
Grüße Ronald
Hallo Harald,
WOW - so schön habe ich das noch nicht gesehen!
Herzliche Grüße,
Florian
Hallo Ronald, hallo Florian!
Ich freue mich auch, dass hier im Forum (wieder) mehr Histologie gezeigt wird. Ich war früher recht aktiv, habe im Moment aber meistens nur die Zeit zu lesen und nicht aktiv zu schreiben.
Schön wenn euch meine Bilder gefallen. Ich werde dann in Zukunft wieder mal mehr Fotos reinstellen!
Liebe Grüße
Harald