Hallo Forum,
hier eine Präparation der "Woll-Ziest" (Stachys byzantina)
Geschnitten wurde der Stängel unterhalb der Blüte.
Jörg (Fahrenheit) hat hierzu einen sehr guten Beitrag geschrieben.
Dieser Beitrag ist ein ganz bescheidener Versuch meinerseits.
Wiki-Information (http://de.wikipedia.org/wiki/Zieste)
Klaus Herrmann hat mir geraten die Färbezeit von AF/AR deutlich zu erhöhen und danach wenig auszuwaschen.
Es entstand aber ein deutlicher Rotstich beim Präparat.
8 Minuten sind wohl ein bisschen viel.
Liebe Grüße
Jochen
- Frische Stängel in AFE gelegt 4 Tage.
- Ein Stängel in Holundermark eingeklemmt und im HAGA-Handmikrotom geschnitten. Beim Schnitt mit 70% Ethanol befeuchtet.
- Schnitte in 70% Ethanol einlegen (Uhrglas) 10 Minuten
- Drei Schnitte aus einer Serie mit Stereomikroskop ausgesucht.
- Die Schnitte in ein Uhrglas überführt, in dem die Färbung durchgeführt wird.
- Fixiermittel auswaschen in 50%-Ethanol 5 Minuten
- 30%-Ethanol 3 Minuten
- 3 mal mit Aqua purificata auswaschen je 1 Minute
- Färbung
- 2 Komponenten W3A Acriflavin/Acridinrot 8 Minuten
- 2 mal mit Aqua purificata auswaschen je 30 Sekunden
- W3A Astrablau 2% 20 Sekunden
- 3 mal mit Aqua purificata auswaschen je 1 Minute
- In Isopropanol entwässert
- 1. Stufe 10 Sekunden
- 2. Stufe 10 Sekunden
- 3. Stufe 3 Minuten
- Einschließen in Euparal und eine M10-Mutter auf das Deckglas gelegt.
- Anschließend auf die Wärmebank 1 Tag
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures003/97145_30471863.jpg)
Foto aus unserem Vorgarten
Mikroskop: Müller BIOLAB
USB – Kamera: Bresser MikroCam 1,3MB
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures003/97145_41386841.jpg)
Objektiv: Zeiss 2,5 / 0,08 planachromat DP55a 11 B02PL#Pi1AxPa.jpg
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures003/97145_19138891.jpg)
Objektiv: Müller 4 / 0,1 planachromat DP55a 12 B04PL#Pi1AxPa.jpg
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures003/97145_46497064.jpg)
Objektiv: Müller 10 / 0,25 achromat DP55a 13 B10AC#Pi1AxPa.jpg
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures003/97145_27331439.jpg)
Objektiv: Euromex 20 / 0,45 achromat DP55a 14 B20AC#Pi1AxPa.jpg
Hallo Jochen,
die Färbung ist schön differenziert aufgezogen, Gewebe verschiedener Funktionalität ist unterscheidbar.
Wenn die Färbung hält, hast Du ein durchaus vorzeigbares Präparat, das Du auch für andere Schnitte referenzieren kannst.
Möchtest Du bei lignifizierten (verholzten) Zellwänden das Rot kräftiger haben, kannst Du die Acridinrot/Acriflavin-Farblösung mit dem Schnitt auf ca. 60° Celsius erwärmen. Für das Erwämen genügt ein Feuerzeug.
Fällt Dir die Rotfärbung zu kräftig aus, kannst Du den Schnitt in 30% Ethanol auswaschen bis kein Rot mehr abgeht. Hierbei ist aber zu bedenken, das die Färbung erst nach Tagen und Wochen in Euparal sicher beurteilt werden kann, denn gefärbte Schnitte differenzieren in Euparal immer etwas nach.
Wenn Schnitte vornehmlich lignifizeirte Zellwände enthalten, ist es vorteilhaft länger in 100% Isopropylalkohol zu entwässern. Ich wechsele teilweise bis zu 4x und 5x den Alkohol.
Bei diesen schönen Färbungen lohnt es sich übrigens über Deine Mikrofoto-Einrichtung nachzudenken.
Viele Mikrogrüße
Rolf-Dieter
Hallo Jochen -
eine kleine Editieraufgabe: Zieste ist die Mehrzahl, da gibt es einige - du beschreibst aber nur den Woll-Ziest.
Viele Grüße
Rolf
Lieber Jochen,
ZitatKlaus Herrmann hat mir geraten die Färbezeit von AF/AR deutlich zu erhöhen und danach wenig auszuwaschen.
Es entstand aber ein deutlicher Rotstich beim Präparat.
8 Minuten sind wohl ein bisschen viel.
Dafür hat der HERR uns die Möglichkeit der Differenzierung gegeben! :D Das Färben ist schon auch immer ein wenig
Versuch und IrrtumUnd
Rot Raus ist viel einfacher, als
Rot Rein ;). Bedeutet: eine leichte Rotüberfärbung ist schnell korrigiert mit etwas verdünntem Ethanol.
Sieht doch aber erfolgversprechend aus! :)
Lieber Joachim,
schön, dass Du Dich auch an den Woll-Ziest gemacht hast! Deine Schnitte scheinen etwas dicker zu sein als meine und somit ist die dichte Behaarung des Sprosses besser erhalten geblieben.
Vielleicht kannst Du noch ein wenig zum Umgang mit deiner Bresser USB-Kamera sagen? Eventuell lässt sich auch mit dieser einfachen Kamera noch ein wenig mehr Schärfe herauskitzeln.
Herzliche Grüße
Jörg
Hallo Jörg,
ich hatte bei diesen Schnitten (ca. 74 - 100µm) Schwiergkeiten Schnitte von 50µm herzustellen. Der Einsatz von anderen
Rasierklingen zeigte sehr erfolgversprechende Ergebnisse bei Schnitten von anderen Pflanzen.
Bei der USB-Kamera benutzte ich die Automatik. Ich stelle das optische Bild (am Biokular) scharf, danach
stelle ich das am Rechner gezeigte Bild, an dem Tri-Anschluß der Mikroskops, scharf und mache das Foto.
Ich sollte am besten von der Automatik die Finger lassen und die manuellen Einstellungen benutzen,
aber ich habe sehr wenig Fotografiererfahrung und muss noch einiges lernen.
Auch sollte ich mir Angewöhnen mit Bildbearbeitungsprogrammen zu arbeiten (ich habe GIMP und Picolay),
aber ich muss im Umgang mit den Programmen noch viel lernen.
Mit der Zeit wird alles besser werden!
Liebe Grüße
Jochen
Könnte man nicht wenigstens im Betreff den Ziest richtig schreiben?
G.Ch.
Sehr geehrter Herr G. Chmela,
könnte man nicht wenigstens eine Anrede schreiben ??
mfg
Jochen
Zitat von: hajowemo in Juli 15, 2012, 09:19:22 VORMITTAG
Sehr geehrter Herr G. Chmela,
könnte man nicht wenigstens eine Anrede schreiben ??
mfg
Jochen
Sehr geehrter Herr Jochen,
das habe ich in einer diesbezüglichen PN an Sie durchaus getan. Sie scheinen allerdings beratungsresistent zu sein.
Mit ebenso freundlichen Grüßen
G.Ch.
Hallo Jochen,
was soll der bizarre Streit? Es ist doch ein Klacks, den Namen zu korrigieren! Zieste aus der Überschrift bei Wiki ist der Plural.
Detlef
Hallo Herr Chmela,
ich hatte bei der PN von Ihnen nicht verstanden das Sie eine Änderung wünschen.
Aber auch im Forum wird sehr viel falsch geschrieben und ich bitte meinen Fehler zu entschuldigen.
Ich bin ein friedlicher Mensch und möchte keinen Streit.
liebe Grüße
Jochen