Liebe Schnibblergemeinde,
Ich stelle euch heute einen Querschnitt durch den Samen einer Erdnuss vor. Dieses Objekt hat mir viele schlaflose Nächte bereitet , da es sehr hart ist. Ich habe lange überlegt wie ich das Objekt zum Schneiden vorbereiten muss. Ich habe es zuerst mit der Paraffineinbetung versucht bin aber mit dieser Einbettungsmethode gescheitert ! Letztendlich habe ich mit einer anderen Methode Schnitte durch dieses sehr harte Objekt machen können. Hier nun erstmal das Bild: Es ist ein Stitch aus 18 Bildern die mit autostitch zusammengestzt wurden und anschließend mit Gimp nachbearbeitet wurden. Als Objektiv diente ein 2,5 X Planachromat.
Für die die es interessiert steht weiter unten wie geschnitten wurde.
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures007/109311_5559262.jpg) (http://www.fotos-hochladen.net)
Geschnitten wurde mit dem Direktschnittverfahren ! Dabei wird das Objekt mit Sekundenkleber auf einen Holzklotz geklebt. Ich habe selbst nicht gedacht , dass es damit klappt aber versuch macht kluch ;)
Ich bin bei diesem Verfahren wie folgt vorgegangen:
Ich habe den Samen einer Erdnuss genommen ( Also das was man normalerweise isst ) und sie dann für eine Nacht in 70 % Ethanol gegeben. Danach habe ich Sekundenkleber der Firme ''Super Glue'' genommen ( Ebay) und ein wenig auf einen Holzklotz draufgegeben. Die Erdnuss wurde dann aus dem Ethanol genommen ,mit Küchenpapier leicht abgetupft und dann im Sekundenkleber positioniert. Das Objekt gegebenenfalls ein wenig stützen damit es schön gerade ist. Danach muss der Kleber aushärten. Bei diesem Objekt ist es sehr wichtig das der Kleber richtig hart wird , da sich sonst das Objekt vom Kleber lösen kann. Nun kommt der Klotz mit dem Objekt in eine ''feuchte Kammer'' damit die Erdnuss nicht austrocknet. Hierzu verwende ich eine Petrischale die am Boden zugeschnittenes Küchenpapier hat. Das Küchenpapier wird mit 70% Ethanol getränkt und das Objekt hineingestellt. auf den Klotz kommt dann ein Schälchen. Während der Klotz mit der Probe in der feuchten Kammer sind muss man immer wieder mit einem in 70 % getränktem Wattestab das Objekt befeuchten.
Wenn der Kleber schön hart geweorden ist spannt man das Objekt im Mikrotom ein. Das Messer wird schräg eingespannt und mit ziehendem Messer geschnitten. Während des Schneidens muss man das Objekt immer feucht halten. Bei der Erdnuss habe ich während dem Schneiden immer Dest. Wasser daraufgegeben, da Wasser aufweichend wirkt. Hat man relativ normales Gewebe kann man weiterin mit 70 % Ethanol befeuchten. Wenn man ein sehr weiches Objekt hat empiehlt es sich die Proben während dem Schnieden mit 100 % Ethanol zu befeuchten damit sie härter werden.
Bild der ''Feuchten Kammer'':
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures003/109311_59456738.jpg) (http://www.fotos-hochladen.net)
Klotz mit augeklebter Erdnuss:
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures003/109311_21807164.jpg) (http://www.fotos-hochladen.net)
Ich hoffe es hat euch gefallen :)
Viele Grüße
David
Lieber David,
und ob mir das gefällt! Dein Hartnäckigkeit bei diesem schwierigen Objekt ist gerade zu ansteckend. Klasse gemacht und aufwändig fotografiert! Und natürlich auch danke für die gute Beschreibung der Methode.
Ich nehme an, Du hast mit einer W3A-Variante gefärbt? Ich hätte nicht gedacht, dass die Zellstruktur der Erdnuss beim Rösten so gut erhalten bleibt.
Herzliche Grüße
Jörg
Hallo David,
Einfallsreichtum ist gefragt! Tolle Idee und brillante Ausführung.
Danke fürs Zeigen.
Herzliche Grüsse
Eckhard
Lieber David,
eine Meisterleistung! Ich hätte nicht geglaubt, dass die geröstete Nuss schneidfähig ist, deshalb war ich ja der Meinung, dass es ohne Einbettung nicht geht. Aber der Kniff mit dem weichmachen hat es offensichtlich gebracht.
Interessant wäre noch eine Lugolfärbung mit sehr verdünntem Lugol - und natürlich eine Fettfärbung mit Sudan III.
Eine Polaufnahme des Schnittes würde sich auch lohnen!
Hallo David,
toll gemacht. Sowas ist Lobenswert zu erwähnen.
Ich freue mich über jeden Beitrag den du machst.
Liebe Grüße
Jochen
Hallo David,
genial hast Du das Problem gelöst!
Du weißt ja, dass andere daran gescheitert sind. ;)
Herzliche Grüße,
Florian
Hallo David,
wieder einmal ein sehr schöner Beitrag von Dir, besonders Deine ausführliche Präparationsbeschreibung macht ihn so lesenswert.
Und die Auflösungssteigerung durch zusammengesetzte Einzelaufnahmen ist eine schöne Lösung, um den Schnitt so und im Detail zu präsentieren.
Gut, der Schnitt sieht zwar etwas ausgestanzt aus, was ist sicher der Bildverarbeitung geschuldet ist. Aber im Schnitt selber ist es ein Genuss die gelungene Färbung zu betrachten.
Viele Mikrogrüße
Rolf-Dieter
Hallo David,
ein gelungener Beitrag und die ausführliche Beschreibung des Verfahrens, fordert es förmlich heraus, es nachzumachen.
Herzliche Grüße
Winfried
Hallo David,
das Problem hast Du sehr clever gelöst, Kompliment auch von mir 8)
Der Schnitt ist ebenfalls toll, sehr gleichmässig, und keine Ausbrüche, was ja bei der harten Nuss nicht einfach sein dürfte.
Herzliche Grüsse
Holger
Hallo David,
lese Deine Beiträge immer mit als erstes. Auch dieser, samt Beschreiben, erste Sahne. Werde ich auch mal versuchen, hoffe auf ähnliche Ergebnisse.
Gruß
Ralf
David does not know much about this but it is a good job.
A greeting.
Hallo David
Großes Kompliment. Dein Bericht reizt zum Nachmachen.
Rollt sich der Schnitt eigentlich nach oben weg, oder geht
er im leichten Bogen von der Klinge?
Danke für den Bericht und viele Grüße
Horst-Dieter
Hallo Zusammen,
Vielen vielen Dank für all das Lob :) Das freut mich immer sehr !
@Jörg:
Ja, ich habe mit W3A-Simultan gefärbt. Bei diesem Objekt musste ich aber die Färbezeiten stark erhöhen, da die Schnitte viel Öl enthalten und somit die Färbe nicht so gut aufnehmen wie üblich. Ich habe eine geröstete und eine keimfähige Erdnuss geschnitten. Der Unterschied in der Zellstruktur ist nur sehr gering !
@Horst-Dieter,
Bevor ich angefangen habe zu schneidenn habe ich auch gedacht, dass der Schnitt wie ein Pappdeckel nach oben geht weil er so hart ist. Das Gegenteil war aber der Fall. Der Schnitt war relativ labrig. Auch wegen seiner Größe ! Er hat sich auf der Klinge zusammengeschoben , ließ sich aber ohne Verletzungen leicht mit einem Pinsel abnehmen.
@frfmfrfm
Thank you :)
Greetings from Germany :)
Viele Grüße
David
Lieber David,
auch von mir ein ganz großes Kompliment! Einfallsreichtum und Hartnäckigkeit machen sich bezahlt. Mach weiter so, ich freue mich über jedes Deiner Experimente und daß wir hier daran teilhaben dürfen.
Herzliche Grüße
Regi
Hallo David,
grad mal 15 jahre und schon so talentiert - ein aufrichtiges Kompliment aus Österreich...
HG
Manfred
Hallo David
Ist wirklich toll geworden, Du hast auch meine Bewunderung ...
Liebe Gruesse
Gerhard
Hallo zusammen,
Auch euch vielen Dank für euer Lob :)
@Manfred Rath
Ein Danke auch an dich ! Ich muss dich aber korrigieren: Ich bin mittlerweile 16 Jahre alt 8)
Viele Grüße
David