diesmal eine kleine Bitte um Erfahrungen.
Ein neu geöffnetes Gebinde von Hämatoxylin Weigert ( Lösungen A+B) von Roth ergab dieses völlig unbefriedigende Ergebnis in der HE Färbung ( Protokoll wie üblich A und B frisch 1:1 gemischt, Färbung 5 Min., Spülung in Aqu dest, Bläuen in Leitungswasser +Basenzusatz 15 Min). Die österreichische Roth Vertretung antwortete, die Reagentien seien völlig in Ordnung....?
Im Vergleich darunter dasselbe Präparat Hämalaun-Eosin gefärbt mit völlig normaler Kernfärbung ( Hämalaun n.Mayer von Merck)
PS hier in Masson Goldner Färbung, noch nie erlebt dass Hämatoxylin keine Kerne anfärbt.
Hallo Ammererlutz,
das Weigert's Hämatoxylin wird vorallem für Trichromfärbungen verwendet, da andere Hämatoxyline durch saure Lösungen entfärbt würden. Hierbei färbt es die Zellkerne Braun-Schwarz.
Ich schätze dass deine HE-Färbung mit Weigert's deshalb nicht blau ist, da die Zusammensetzung eine andere ist.
Welches Hämatoxylin hast du denn für die MG verwendet und wie lange - falls es das nach Mayer war, solltest du es unbedingt mit Weigert's wiederholen!
PS: sehr schöne Schnitte hast du da! :)
Liebe Grüße,
Molin
Zitat von: Molin in August 29, 2019, 14:51:30 NACHMITTAGS
Hallo Ammererlutz,
das Weigert's Hämatoxylin wird vorallem für Trichromfärbungen verwendet, da andere Hämatoxyline durch saure Lösungen entfärbt würden. Hierbei färbt es die Zellkerne Braun-Schwarz.
Ich schätze dass deine HE-Färbung mit Weigert's deshalb nicht blau ist, da die Zusammensetzung eine andere ist.
Welches Hämatoxylin hast du denn für die MG verwendet und wie lange - falls es das nach Mayer war, solltest du es unbedingt mit Weigert's wiederholen!
PS: sehr schöne Schnitte hast du da! :)
Liebe Grüße,
Molin
MG geht mit Mayer nicht, da die Phosphorwolframsäure und die Essigsäure ja das Hämalaun auswäscht, bei Masson-Goldner war es daher auch das Hämatoxylin nach Weigert von Roth, wie man sieht blieben die Kerne der epidermalen Zellen aber praktisch ungefärbt
Guten Morgen Lutz,
welche Fixierung für das Präparat hast Du verwendet ?
Nicht oxidierende Fixierungen wie Formalin ergeben bei Hämatoxilin nach Heidenhain zumindest oft schlechte Ergebnisse.
Dein Präparat sieht ähnlich aus wie meine Heidenhein Färbungen.
Routine Fixierung ist bei uns immer Formalin 4% gepuffert
Lösung des Rätsels:
Lactan/ Roth schickte mir- trotz Versicherung dass die Reagentien einwandfrei wären- heute eine andere Charge...nun einwandfreie Kernfärbung
Lösung A der erstren Charge war also offenbar oxidiert !
Facit: falls jemand also Probleme mit Hämatoxylin Färbungen hat, es kann an vorzeitiger Oxidation der Lösungen liegen, was bei fabriksneuen Gebinden eigentlich nicht vorkommen sollte.
Bild 1 vor Gegenfärbung,
Bild 2 nach Gegenfärbung mit Eosin , jedoch vor Äthanol-Reihe/ Differenzierung, da das Präparat verworfen wurde.