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Foren => Mikroskopie-Forum => Thema gestartet von: Carsten Wieczorrek in November 29, 2020, 20:59:06 NACHMITTAGS

Titel: Pilzschnitte färben
Beitrag von: Carsten Wieczorrek in November 29, 2020, 20:59:06 NACHMITTAGS
Hallo Fachleute,

ich bade gerade einen Pilz in Paraffin und werde ihn demnächst schneiden. Was ist denn die empfehlenswerteste Färbung für Pilzgewebe?

Grüße
Carsten
Titel: Re: Pilzschnitte färben
Beitrag von: Hugo Halfmann in November 29, 2020, 21:33:12 NACHMITTAGS
Hallo Carsten,

wenn vorhanden, nimm Methylenblau!
Titel: Re: Pilzschnitte färben
Beitrag von: Gerd Schmahl in November 29, 2020, 21:55:20 NACHMITTAGS
Hallo Carsten,
oder Baumwollblau.
LG Gerd
Titel: Re: Pilzschnitte färben
Beitrag von: Bernd Miggel in November 29, 2020, 22:17:35 NACHMITTAGS
Hallo Carsten,

ich bin sehr gespannt auf das Ergebnis! Um welche Pilzart handelt es sich denn?

Viele Grüße
Bernd
Titel: Re: Pilzschnitte färben
Beitrag von: Peter Reil in November 29, 2020, 22:22:43 NACHMITTAGS
Hallo Carsten,

das wäre auch meine erste Frage gewesen: Was für ein Pilz?

Je nachdem, was du dann sehen möchtest, würde ich die Färbung ausrichten.

Freundliche Grüße
Peter

PS: Die Puristen unter den Pilzlern  färben gar nicht!  :)
Titel: Re: Pilzschnitte färben
Beitrag von: Carsten Wieczorrek in November 30, 2020, 09:25:53 VORMITTAG
Hallo,
ich bin ja kein Pilzfachmann, ist wohl nur ein Champignon: Macrotyphula verm. fistulosa.  :D
Oder etwas sehr ähnliches.
Carsten
Titel: Re: Pilzschnitte färben
Beitrag von: Peter Reil in November 30, 2020, 09:34:06 VORMITTAG
Hallo Carsten,

bei dem ist alles mehr oder weniger farblos. Baumwollblau ist also eine gute Idee.

Freundliche Grüße
Peter
Titel: Re: Pilzschnitte färben
Beitrag von: Alf in November 30, 2020, 13:30:58 NACHMITTAGS
Hallo,

Hämatoxylin-Eosin funktioniert auch gut.

LG,
Alf
Titel: Re: Pilzschnitte färben
Beitrag von: Gert Flemming in November 30, 2020, 16:16:55 NACHMITTAGS
Liebe Pilzschnipsler,

ich färbe meine Paraffinschnitte von Pilzen (Mikrotom, 8µm und dünner) seit längerer Zeit am liebsten mit
Pianese plus Lichtgrün
(Rezepturen sind in der allgemein bekannten Mikroskopiegrundliteratur und auch bei Eisner, enthalten).

Folgend mein prinzipielles Vorgehen:
- Schnittherstellung, -streckung, -aufklebung auf Objektträger lege artis (,,nach den Regeln der Kunst", da hat wohl
auch außerdem jeder seine eigenen Erfahrungen und bewährten Methoden),
- Entparaffinierung in Xylol, 10 min,
- Isoprop abs, 5 min,
- evtl. noch Collodiumguss zur Fixierung der Sporen einschieben,
- Alkoholreihe weiter abwärts,
- Färbung in Pianese, 3 Stunden,
- gründliche Differenzierung (Isoprop abs 2 min, Ethanol 70%ig 30 sec bei guter Bewegung, Ethanol 96%ig 2 min),
- Lichtgrün, 1 ... 2 min, je nach Dicke der Schnitte,
- Isoprop abs, 30 sec, bei guter Bewegung,
- Isoprop abs, 5 min,
- Xylol, 5 min,
- Einschluss in Neutralbalsam.

Neutralbalsam verwende ich seit 1962, damals von Hollborn, Leipzig, hergestellt. Ich war all´ die Jahrzehnte voll zufrieden,
Färbungen von damals sind noch voll erhalten.
Pianese lässt sich gut und gründlich differenzieren (und dass ist auch notwendig!) – es haftet sehr gut und hochelektiv an den Kernen.
Den Rest der Strukturen färbt dann das Lichtgrün.

Mit freundlichen Grüßen
Gert Flemming
Titel: Re: Pilzschnitte färben
Beitrag von: Peter Reil in November 30, 2020, 16:32:10 NACHMITTAGS
Hallo Gerd,

hört sich spannend an.

Hast du evtl. ein Bild als Beispiel?

Freundliche Grüße
Peter
Titel: Re: Pilzschnitte färben
Beitrag von: A. Büschlen in November 30, 2020, 20:15:01 NACHMITTAGS
Hallo Carsten,

hier : https://www.dgfm-ev.de/publikationen/beihefte-z-mykol/beiheft-12-2012-grosspilze-im-mikroskop
findest du 4 PDF die dich weiterführen.

Viel Erfolg.

Arnold Büschlen
Titel: Re: Pilzschnitte färben
Beitrag von: Bernd Miggel in Dezember 01, 2020, 08:49:16 VORMITTAG
Hallo Alf,

ein Bild mit Hämatoxylin-Eosin-Färbung würde mich sehr interessieren!

Viele Grüße - Bernd