Liebe Foristen!
Ich plage mich gerade mit Schnitten der Mistel. Schnitte vom Sproß rollen sich am Rand auf bzw. Querschnitte vom Blatt verdrehen sich spiralförmig, also Eindecken ziemlich sinnlos. Mein Procedere. Aus AFE in die Alkoholreihe, W3Asim Färbung und direkt in Isopropanol. In diesem bekommen die Schnitte dann ihren "Dreh". Gibt es da einen Trick?
Beste Grüße
Thomas
Lieber Thomas,
Tipps vielleicht, aber wohl kein Patentrezept. :)
- Unterstütze kritische Proben (meist harte Hölzer und Gewebe mit stark unterschiedlichem Aufbau) beim Schnitt mit einem Pinsel. Ich lege diesen sanft auf die Schnittfläche und schneide dann auf dem Zylindermikrotom mit SHK Halter unter dem Pinsel entlang. Der Pinsel "geleitet" den neuen Schnitt also auf den Halter, so dass er sich nicht schon da einrollen kann.
Wichtig ist auch ein stark ziehender Schnitt.
- Versuche nicht, z.B. das Mistelblatt in ganzer Breite zu schneiden, sondern nimm nur einen Ausschnitt. Epidermis und Cuticula bauen sonst ggf. eine zu hohe Spannung auf, die sich im Isopropanol durch Einrollen entläd.
- Du kannst versuchen, stufenweise über Ethanol ins reine Isopropanol zu gehen, dabei ist aber die stark differenzierende Wirkung des Etzhanol-Wasser gemischs zu beachten: flache aber blasse Schnitte sind ja auch nicht das Ziel.
- Zu guter Letzt kannst Du bereits gerollte Schnitte vorsichtig mit dem Pinsel über die Kante eines Schnittfängers zu ziehen, der nur ganz knapp ins Isopropanol eintaucht. Das verdunstende Isopropanol sorgt dann für eine gewisse Haftung des Schnittes auf der Fläche des Schnittfängers und er bleibt gerade liegen.
Mit dem Pinsel bekommst Du ihn leicht feucht so auch auf den Objektträger (ziehen, nicht schieben).
Dummerweise kann es passieren, dass sich der Schnitt wieder etwas einrollt, sobald Du das Eindeckmittel (z.B. Euparal) darauf tropfst. Da hilft dann nur Glück und schnelles Hantieren mit dem Deckglas.
Herzliche Grüße
Jörg
Guten Morgen Thomas
Das Problem kann meiner Erfahrung schon beim Schneiden beginnen wenn der Messerwinkel nicht passt oder die Schärfe des Messers. Beides führt zu Stauchungen die sich in den Bädern auswirken. Robert hat uns bei seinem Vortrag über Holzveredelung gezeigt das er die Schnitte zwischen 2 Objektträger spannt - natürlich in Flüssigkeit damit sie nicht austrocknen. Ich habe das selbst noch nie gemacht, aber frag ihn doch einmal.
Robin Wacker hat die widerspenstigen Schnitte irgendwie auf vorbehandelte Objektträger ,,aufgeklebt" und dann gefärbt. Am Objektträger, ich habe damals bei meinem Besuch von ihm so viel gesehen das ich nicht alles für mich umsetzen konnte, meine Fragestellung hat sich auf ein anderes anderes Thema bezogen. Leider war das mein letzter Besuch, sein Tot hat weitere Besuche ...
Liebe Grüße
Gerhard