Hallo,
ich habe ja schon in der Vergangenheit bemerkt, dass mein Acridinorange die Makronuklei grosser Cilliaten nur sehr unwillig färbt.
Ich habe die Hefe-Futter-Probe (Inkubationszeit jetzt gute 24 Stunden) mit einem kleinen Tropfen Acridinorange und Rhodamin 6G nachgefärbt und nach 5 Minuten mikroskopiert.
Anregung 430 nm, Filterwürfel CZJ 450-3/0, Sperrfilter G245, 400 ASA 1/4 Sekunde Belichtung.
Bild 1 : Ein buntes Paramecium, da, wo ich den Makronukleus vermute, ist ein schwarzes Loch
Bild 2 : Ein Paramecium (oder zwei) im Teilungsprozess, zwei schwarze Löcher (die kleinen länglichen schwarzen Löcher sind die Mundöffnungen)
Bild 3 : Ein mittelgroßer Cilliat, der offensichtlich keine Hefe mag, auch hier ein schwarzes Loch
Bild 4 : Ein kleiner Cilliat, und siehe da, der Nukleus leuchtet grün.
Alle 4 Tiere kommen nicht nur aus der gleichen Probe, sondern auch aus dem gleichen Objektträger. Also definitiv gleiche Farbstoffkonzentration und gleiche Inkubationszeit. Kann das jemand erklären?
Schöne Grüße
Carsten
Hallo Carsten,
ich habe vor ca. 2 Monaten ein sehr ähnliches Experiment gemacht.
https://www.mikroskopie-forum.de/index.php?topic=45897.0
Ich konnte dabei beobachten dass der Makronucleus ganz zu beginn der Inkubation mit AO
Angefärbt wird, dann aber verschwindet (schwarzes Loch).
Durch alkalisieren des Mediums war der Makronucleus länger sichtbar, ebenso bei
Doppelfärbung mit AO und Rhodamin.
Weil anaerober Stoffwechsel zu einer Ansäuerung der Zelle führt und Alkali das abpuffert
denke ich das der Kern vielleicht durch Ansäuerung seine Färbbarkeit verliert.
Zusätzliches Rhodamin könnte zu einer veränderten Eiweißbindung der Farbstoffe führen.
Leider habe ich die Experimente nicht weiter geführt, aber vielleicht hast Du ja die Zeit,
schöne Aufnahmen übrigens.
LG Ralf