Hallo,
ich habe eine Algenprobe aus meinem Gartenteich untersucht und mir dabei Spirogyra angesehen. In der Zeichnung im Wassertropfen ist etwa in der Zellmitte der Zellkern eingezeichnet. Im Durchlicht konnte ich davon nichts sehen. Also habe ich eine kleine Probe mit Acridinorange + Rhodamin 6G versetzt und nach 15 Minuten in Auflichtfluoreszenz betrachtet. Dadurch sollte sich der Zellkern irgendwie als grüner Punkt zu erkennen geben.
Technik: Auflicht mit 430 nm LED, Filterwürfel CZJ 350-3/0, Sperrfilter G242, Belichtung 1 sec. bei 400 ASA.
Bild 1 zeigt als Beispiel eine Closterium. Dort, wo man den Zellkern erwarten würde, leuchtet es grün.
Bilder 2 und 3: Spirogyra, nix leuchtet grün
Bild 4: Auch Spirogyra, in der Probe zeigte sich nur eine Zelle, die offensichtlich das Rhodamin 6G in die Vakuole aufgenommen hat.
Da stellen sich die Fragen
- wo ist der Zellkern bzw. warum läßt er sich nicht färben?
- warum nimmt eine Zelle den Fluoreszent-Farbstoff in die Vakkuole auf, alle anderen nicht?
Schönen Sonntag,
Carsten
Edit: Spirolina korrigiert zu Spirogyra
vielleicht stehe ich am schlauch, aber meinst du nicht spirogyra?
Ja, natürlich.
Korrigiert.
Carsten
Hallo Carsten,
schau mal hier:
https://www.mikroskopie-forum.de/index.php?topic=31595.msg234327#msg234327
Ich habe gerade welche unters Mikroskop gelegt; die kerne befinden sich jeweils zentral in der "Röhre" und sind an Plasmafäden aufgehängt.
lg
anne
Hallo Anne,
ja, genau so ist es im Wassertropfen abgebildet. Ich hatte nur die Hoffnung, die mit Acridinorange färben zu können.
Grüße
Carsten
Hallo Carsten,
für die Kerne brauchst Du eine stark verdünnte DAPI- Lösung und einen Filtersatz für UV- Anregung so um 390 nm und dazu ein Langpassemissionsfilter. LP 420 nm. Damit leuchten auch die Chloroplasten gleichzeitig in Rot. Die Nuclei leuchten in Hellblau.
LG
Michael
Zitat von: Carsten Wieczorrek in Juli 16, 2023, 19:04:03 NACHMITTAGSHallo Anne,
ja, genau so ist es im Wassertropfen abgebildet. Ich hatte nur die Hoffnung, die mit Acridinorange färben zu können.
Grüße
Carsten
Hallo Michael,
an den Filtern und Wellenlängen sollte es nicht liegen. Alleine, es mangelt am DAPI 😢
Aber warum geht hier Acridinorange nicht?
Carsten
Zitat von: Carsten Wieczorrek in Juli 17, 2023, 06:06:54 VORMITTAG
an den Filtern und Wellenlängen sollte es nicht liegen. Alleine, es mangelt am DAPI 😢
Hallo Carsten,
Etwas DAPI kannst Du von mir bekommen. Das ist für Zellkerne wirklich am Besten.
Viele Grüße
Alexander