Hallo.
Von Zeit zu Zeit beleuchte ich meine Präparate wieder mit UV-Licht.
Manchmal sind die Ergebnisse spektakulär und manchmal nicht.
Der überwiegende Teil meiner Beobachtungen betrifft Autofluoreszenz, also die Fähigkeit von Präparaten, unter dem Einfluss von Anregungslicht spontan zu ,,leuchten".
Ich möchte aber noch einen Schritt weiter gehen und fluoreszierende Farbstoffe wie Acridinorange, Fluorescein, Rhodamin verwenden.
Die Färbetechniken mit diesen Substanzen sind kompliziert und zu Hause nur schwer durchzuführen.
Gibt es einfache Möglichkeiten?
Im Anhang:
- Die ersten vier Fotos zeigen Autofluoreszenz von Flechten
_ Die letzten beiden sind die Fluoreszenz eines Querschnitts eines Pflanzenstamms.
Der Querschnitt wurde sehr nachlässig angefertigt und mit Acridinorange eingefärbt.
UV-Beleuchtung.
Grüße
Maciej
Hallo Maciej,
das Stereobild von den Flechten ist der Hammer!
Danke und weiter so.
Hallo Maciej,
das sind wirklich klasse Bilder. Die Stereoaufnahmen gefallen mir besonders gut. Hast du die durch Stacking erzeugt, oder auf anderem Weg?
Viele Grüße
Michael
Hallo,
dickes Kompliment für die Stereobilder!
Gruß
Peter
Hallo Maciej,
ich war mal so kess und hab eins Deiner Bilder als Bildschirmschoner gespeichert, kommt einfach gut!
Grüße
Wolfgang
Hallo Maciej,
auch ich finde ganz besonders die Stereobilder sehr gelungen. Ich hätte mir aber gewünscht, Du hättest Sie etwas größer gelassen. Da sie nicht sehr hoch sind, kann man sie ruhig mit 1600pix Breite ins Forum stellen. Wenn man sie dann in einem neuen Tab öffnet, hat man sie schön für sich und (zumindest auf meinem Bildschirm) in voller Bildschirmbreite.
LG Gerd
Hallo
Ich freue mich sehr, dass meine Fotos Ihre Anerkennung gefunden haben.
Jürgen Boszert – vielen Dank für Ihre nette Meinung.
Ich bin der gleichen Meinung, dass Flechten ein großes Potenzial als fluoreszierende Präparate haben.
Michael – in der Tat können Stereofotos, wenn sie gut gemacht sind, viele Eindrücke vermitteln.
Aber wahrscheinlich nur künstlerischer Natur.
Ich habe die Fotos in Stapeln angeordnet.
Etwa 200 Stück.
Ich benutze ZereneStacker schon seit langer Zeit.
Piotr – vielen Dank für deine netten Worte.
Aber ich habe nur den Rahmen zur Verfügung gestellt.
Die Software, die ich verwende, hat die ganze Arbeit erledigt.
Wolfgang - ich freue mich sehr.
Ihre Worte haben mir große Freude bereitet.
Gerd – Ich gebe zu, dass Fotos von Flechten im Fluoreszenzlicht aufgrund der Farben, die wir erhalten, manchmal sehr attraktiv sind.
Und Stereopaare sind oft geradezu spannend, weil sie die Tiefe des Bildes imitieren.
Bei der Fotoauflösung schien es mir eine Grenze von 1024 Pixeln und 300 KB zu geben.
Erst nach Ihrem Kommentar ist mir aufgefallen, dass einige im Forum gepostete Fotos 1600 Pixel haben.
Daher habe ich meine Fotos auf die Größe 1600 zugeschnitten und werde sie in den Anhang einfügen.
Bitte betrachten Sie dies als Test.
Grüße
Maciej
Hallo Maciej,
ja, jetzt kommen die Stereobilder noch besser. Man muss sie allerdings in einem neuen Tab öffnen, um sie in voller Größe zur Verfügung zu haben. Ich finde es sehr angenehm, dass die neue Forensoftware die verschieden breiten Fotos gleich breit darstellt und ich nicht mehr die Größe der Bildschirmansicht anpassen muss, um ein großes Bild als Ganzes sehen zu können.
Noch eine Frage zu den krassen Farben: Ist das der Unterschied zwischen toten und lebenden Flechten oder zwischen verschiedenen Spezies?
LG Gerd
Hallo liebe Runde, Servus Maciej!
Das sind großartige Ergebnisse, ausgesprochen gut gelungen und selbst abgesehen von deren botanischen Qualitäten alleine ,,nur so" ein ästhetischer Anblick.
Wissenswert wären bitte paar Details zum verwendeten Equipment.
Für die Fluoreszenzmikroskopie nutze ich zur Zeit einen FH IV Epi-Kondensor, der für die ZEISS Standard Bautypen konzipiert wurde und angenehm kompakt gehalten ist. Momentan nutze ich diesen nur mit einem Filter-Set für Blauanregung.
Für Blau habe ich eine 3 Watt LED Beleuchtungsvorrichtung, die in ein handliches Lampenhaus 60 von Zeiss eingebaut wurde.
Eine äußerst massiv hellere 50 Watt Quecksilber-Hochdruck-Lampen-Einrichtung ist auch vorhanden.
Funktioniert wunderbar, allerdings ist ein Filtersatz für UV defacto nicht zu bekommen. Für Grün geht es aber noch. Will man UV, bleiben nur Optionen wie das anfertigen-Lassen, was etwas teuer werden kann.
Ein gut geplantes Umsteigen auf ältere Leitz oder Olympus-Systeme (samt Mikroskop natürlich) scheint mir diesbezüglich durchaus eine Option zu sein ...
Alles von mir erwähnte bezieht sich auf ältere Baureihen der genannten Hersteller.
Zu den Acridinorange-Färbungen (die letzten 2 Beispiele): Bei solchen spielt der pH-Wert ein wichtige Rolle. Dieser erzeugt sehr deutliche Unterschiede bei Präparationen.
Bei der Verwendung gängiger Säure-Basen-Puffer kann es auch darauf ankommen, ob eine vorangegangene Fixierung erfolgte oder nicht.
In geeigneter Verdünnung kann man mit Acridinorange ,,lebende" Proben darauf hin untersuchen, was tatsächlich noch lebt oder bereits abgestorben ist.
Achtung bitte: Mit Acridinorange bitte nur mit Handschuhen arbeiten. Die Substanz soll cancerogen sein. Falls Du mit diesem Färbemittel in Pulverform hantierst, ist auch eine Maske anzuraten (Einatmen vermeiden etc. ).
Ich freue mich bereits über weitere Bilder von Dir, weiter so!
Liebe Grüße
Jakob
Hallo
Gerd - Ich bin kein Biologe, daher ist es für mich schwierig zu bestimmen, ob es sich um die gleiche oder eine andere Flechtenart handelt.
Entschuldigung.
Auf den Fotos im Anhang "leuchten" die Flechten in der Farbe.
Die blaue Farbe im oberen Teil zeigt jedoch das Substrat, das für die Aufnahme der Flechten vorbereitet ist.
Dies ist ein Fragment eines kleinen Astes mit Flechten.
Die Fotos wurden kurzfristig aufgenommen und sind daher von wesentlich schlechterer Qualität.
Jakob - Vielen Dank für Ihren Kommentar.
Ich verwende ein ZEISS FLUOVAL-Stativ für Fluo-Beobachtungen.
Darauf habe ich den gleichen Kondensor wie den Ihren montiert.
Ich habe zwei Einsätze dafür, d.h. vier Sätze von Filtern:
1. 390-420
FT 425
LP 450
2. BP 436
FT 460
LP 470
3. 546 BP
FT 580
LP 590
4. 450-440
FT 510
LP 520.
Ich verbürge mich nicht für ihre Zuverlässigkeit, da die Beschreibungen handschriftlich auf den Aufklebern vermerkt sind.
Ich habe die ursprüngliche Lichtquelle verwendet, eine 100-W-Quecksilberlampe, die auf klassische Weise an einen Kondensator angeschlossen war, aber alles war überbelichtet.
Jetzt beleuchte ich den Tisch direkt mit einer 3-W-UV-LED-Taschenlampe.
Das reflektierte Licht wird durch Filter geleitet und fällt auf den Sensor der Pentax FX-Kamera.
Vielen Dank für Ihre Warnungen bezüglich der Verwendung von Acridinorange.
Mit freundlichen Grüßen
Maciej
Hallo,
Was für eine Brille muss man aufsetzen, um die tollen Bilder in Stereo zu sehen?
Danke und viele Grüße
Alexander
Hallo Alexander,
es braucht keine zusätzliche Brille. Es ist einfach der "Kreuzblick".
Da muss man etwas üben, aber wenn man es mal kann ist das ein Klacks.
Gruß
Peter
Hallo Alexander.
Wie Peter erwähnte, erfordert die Beobachtung von Stereopaaren keine zusätzliche Ausrüstung.
Sie müssen nur in der Lage sein, Ihre Augen zu kreuzen.
Wenn Sie ein Problem haben, empfehle ich Ihnen diese Übung.
Setzen Sie sich an Ihren Schreibtisch und schauen Sie auf die Wand.
Während Sie auf die Wand schauen, legen Sie Ihren rechten Zeigefinger (wenn Sie Rechtshänder sind) auf Ihren Mund und Ihre Nasenspitze.
Sie sollten zwei Finger sehen.
Bewegen Sie nun langsam Ihren Finger von Ihrem Gesicht weg.
Versuchen Sie gleichzeitig, Ihren Blick auf den Finger zu richten, der wegbewegt wird.
Sobald Sie einen Finger sehen, schielen Sie die Augen.
Meiner Meinung nach sollte die Hand etwa 10 cm vom Gesicht entfernt sein.
Üben Sie dies 10, 20 Mal
Jetzt können Sie das Stereopaar betrachten.
Schauen Sie sich das Stereofoto an und kreuzen Sie Ihre Augen, so wie Sie es getan haben, als Sie den wegbewegten Finger gesehen haben.
Und wenn man es erst einmal gelernt hat, wird es wie Fahrradfahren sein.
Das kann man nicht vergessen.
Viel Glück.
Grüße
Maciej
Hallo,
ich finde den Kreuzblick anstrengend. Deshalb würde ich mir lieber eine animierte GIF Datei ansehen, dann kann jeder sofort die Effekte sehen.
Ich habe mal aus den Kreuzblickbildern je ein GIF mit Picolay erstellt.
Die Bilder finde ich übrigens toll.
LG Frank
fluoreszenzB.gif
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fluoreszenzD.gif