Hallo Zusammen,
Anbei eine Aufnahme bei der es mir gelungen ist den Mageninhalt eines Ruderfusskrebses (stimmt das?) abzubilden. Das ganze als Collage damit man die Aufnahme in relation zum Tier setzen kann.
Liebe Grüße Daniel 445C8664-AD24-4085-B425-C5CEBC1C5775.jpeg
Als Datei
Hallo Daniel,
Zitat von: Daniel Scheibenstock in November 03, 2024, 22:51:17 NACHMITTAGSHallo Zusammen,
Anbei eine Aufnahme bei der es mir gelungen ist den Mageninhalt eines Ruderfusskrebses (stimmt das?)
Ja, dein Exemplar gehört zur Unterklasse der Copepoda (Ruderfusskrebse).
Schön das sich noch mehr mit dem Thema Fluoreszenz beschäftigen.
Welchen Filtersatz, Beleuchtungsart und welche Kamera hast du für die Aufnahme genutzt?
Wurde das am Universal aufgenommen?
Ich gehe mal davon aus, das hier Autofluoreszenz von gefressen Algen zu sehen ist. Mit zwei verschiedenen Filterkombinationen, richtig?
Grüße Holger
Hallo Holger,
Die Fragen beantworte ich dir gerne:
Zeiss IM35
Mit einer Sony Alpha IV
Licht macht eine Xenon Eigenbau Lampe
Filtersatz war: 450-490/ FT510 / LP520
Ja es handelt sich um auto Fluoreszenz. Das Signal war relativ Schwach daher habe ich noch etwas in Lightroom nachbearbeitet
Ah, okay.
Dann ist das letzte Bild mit dem schwarzen Hintergrund also aus dem ersten per Bildbearbeitung entstanden?
Hast du auch eine Möglichkeit LED's einzusetzen?
Wäre sicherlich von großem Nutzen:
-Kein UV-Anteil wie bei Xenon
-Bessere Bildergebnisse bei der genannten Filterkombination
-Wird nicht heiß
Grüße Holger
P.s.:
Ein Bild von deinem Beleuchtungsstrahlengang, gerne auch von deiner Xenon Beleuchtung, wäre hilfreich.
Zitat von: Spectrum in November 04, 2024, 00:34:22 VORMITTAGP.s.:
Ein Bild von deinem Beleuchtungsstrahlengang, gerne auch von deiner Xenon Beleuchtung, wäre hilfreich.
So habe ich es gelöst: Die Xenon-Lampe hat noch ihr UV-Schutzrohr (am IM35 nutze ich ohnehin nur einen Filtersatz).
Die Bilder sind alle vier unterschiedlich!
Für die LED werde ich demnächst eine eigene Lösung für das Universal basteln, um den Vergleich selbst durchführen zu können und herauszufinden, was mir besser gefällt. Beim Universal habe ich vier Kanäle für die EPI-Fluoreszenz, was die Sache ohnehin etwas komplexer macht.
Ok, verstehe.
Was ich bei deiner angegebenen Filterkombination nicht verstehe, ist das, vorausgesetzt es handelt sich hier wirklich um Chlorophyll, die Fluoreszenz rot sein müsste.
Ist aber grün :o
Oder wurde das Bild oben rechts auch bearbeitet?
Aber was man jetzt schon sagen kann ist das der cyanfarbene Hintergrund darauf beruhen dürfte, das dort kurzwelliges Anregungslicht durchkommt...
Und da hätte ich persönlich bei einer Lichtquelle wie Xenon schon ein mulmiges Gefühl. Ich würde da nur mit der Kamera arbeiten, und die Okulare aussen vor lassen.
Mach doch für den Anfang am besten Aufnahmen von einem Moosblättchen. Das ist besser vergleichbar.
Lieber Daniel,
ich kann da Holger nur beipflichten: Sei vorsichtig mit den Brennern! Hast Du denn ein Sperrfilter im Strahlengang?
Tip:
Falls du eine Brille mit photochromen Gläsern auftreiben kannst, halte sie mal dorthin wo sonst dein Objektträger ist...
Zitat von: Spectrum in November 04, 2024, 09:37:58 VORMITTAGWas ich bei deiner angegebenen Filterkombination nicht verstehe, ist das, vorausgesetzt es handelt sich hier wirklich um Chlorophyll, die Fluoreszenz rot sein müsste.
Ist aber grün :o
Hallo Holger,
Das ist keine Autofluoreszenz von Chlorophyll. Ich nehme eher an, dass ein Fluophor wie etwa Acridinorange zu Einsatz kam, den das Tierchen mit der Nahrung aufnahm.
ZitatAber was man jetzt schon sagen kann ist das der cyanfarbene Hintergrund darauf beruhen dürfte, das dort kurzwelliges Anregungslicht durchkommt...
Und da hätte ich persönlich bei einer Lichtquelle wie Xenon schon ein mulmiges Gefühl. Ich würde da nur mit der Kamera arbeiten, und die Okulare aussen vor lassen.
Dieses Leuchtmittel setzt kein UV frei, dazu müsste man das Schutzrohr entfernen. Der grüne Hintergrund hat eine andere Ursache, meiner Ansicht nach den im Wasser vorhandenen Farbstoff.
Viele Grüße
Alexander
Hallo Zusammen,
Es freut mich sehr das so eine rege Diskussion entstanden ist :)
So der Reihe nach:
@alexander: es wurden keine Farbstoffe zugesetzt.
@Holger: die Rote Farbe wurde bei der Bearbeitung leider entfernt. Aber die Abbauprodukte von pflanzlichen Material können die grün/ gelbe Färbung erklären. Der blaue Hintergrund ist wahrscheinlich darauf zurückzuführen das ich vergessen habe das Licht des Zimmers auszuschalten :-[
Von was für einer Brille redest du da?
Die Bilder von klassischer autofluoresenz reiche ich nach
Liebe Grüße Daniel
Anbei die Bilder:
Eines unbearbeitet und eines von Algen
@Jürgen: ich gehe stark davon aus das da alles passt bei mir
Hallo,
Das passt schon! Weder der Anregungsfilter noch der Emissionsfilter lassen UV durch, das Schutzrohr des Leuchtmittels auch nicht.
Wichtiger ist aus meiner Sicht ein Wärmeschutzfilter. Xenon-Lampen strahlen verdammt viel IR ab. Der Anregungsfilter lässt diese Strahlung ab 1000 nm ungehindert durch, der Emissionsfilter sowieso. Da wird es den Proben schnell zu warm.
Was das Raumlicht anbelangt: Ich lege beim Inversmikroskop einfach ein Stück schwarzen Bastelkarton auf die Petrischale. Schon ist der Hintergrund schwarz.
Viele Grüße
Alexander
Alexander
Der Wärmeschutzfilter ist doch der kleine Schieber, den ich am IM vor dem Filterblock habe, oder?
Die Lösung mit dem Karton gefällt mir – so simpel wie genial! 😊 Man fühlt sich ja schon ein wenig seltsam, wenn man allein im dunklen Zimmer sitzt. ;D
Alles klar, das Bild der Alge hilft weiter. Sieht doch auch schon ganz gut aus. Kräftige rote Autofluoreszenz, und der Hintergrund ist relativ dunkel. Genauso sollte es sein. :)
Dieses Bild ist unbearbeitet und die Kamera war laut Exif auf Iso1000 1/2sec eingestellt? Was mich beim Cyan irritiert hatte, war das es kurzwelliger als 520nm ist. Eigentlich dürfte das ja dann nicht durch den Sperrfilter, wenn dann nur grün bis Infrarot.
Das mit dem Karton und dem Wärmeschutzfilter sind gute Tips.
Das mit dem Infrarot ist auch ein interessanter Ansatz. Vielleicht kommt es da auf dem Kamerasensor auch zu Artefakten, wenn der Wärmeschutzfilter vor dem Sensor nicht ausreicht.
Photochrome Gläser sind die Brillen die sich Draußen bei Sonne von selbst verdunkeln. Die reagieren auf UV und teilweise auch violettes Licht. Also genau die Wellenlängen die du mit dem Filtersatz für Blau nicht in deinem Anregungslicht haben willst. Schau mal auf die Bilder meiner Brille. Da sieht man was ich meine:
20241104_114221.jpg
Damit kannst du testen.
Die dunkle Tönung hält eine Weile lang an.
20241104_114226.jpg
Und bitte nicht falsch verstehen, ich will hier nicht das "Panikorchester aufspielen lassen", oder so.
Aber bei UV gilt bei mir "safety first", nicht mehr und nicht weniger.
Gutgemeinte Grüße Holger