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Foren => Mikrofoto-Forum => Thema gestartet von: Eckhard in Juli 11, 2010, 20:20:01 NACHMITTAGS

Titel: Japanische Sicheltanne
Beitrag von: Eckhard in Juli 11, 2010, 20:20:01 NACHMITTAGS
Hallo,

die Sicheltanne, Cryptomeria japonica, gehört zu den Zypressengewächsen. Hier ist ein Wiki  (http://de.wikipedia.org/wiki/Sicheltanne) Link.

Dies ist mein erster halbwegs gelungener Paraffinschnitt, gefärbt mit Etzold FCA.

(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures002/44042_2825793.jpg)
10x

Edit: es ist ein junger Spross, rechts sieht man den Ansatz einer Nadel. Die Nadeln wirken seidenweich.

Herzliche Grüsse
Eckhard
Titel: Re: Japanische Sicheltanne
Beitrag von: Detlef Kramer in Juli 11, 2010, 21:02:21 NACHMITTAGS
Lieber Eckhard,

sehr schön, in den Lichtern, zumindest auf meinem Monitor etwas ausgefressen, aber man sieht alles klar, scharf und kontrastreich, wie immer bei Deinen Fotos.

Aber, was sehen wir denn jetzt eigentlich? Nadel, Spross oder Wurzel? Ich denke, es müsste ein junger Spross sein - vielleicht kannst Du es bestätigen (oder auch nicht).

Herzliche Grüße

Detlef
Titel: Re: Japanische Sicheltanne
Beitrag von: Eckhard in Juli 11, 2010, 21:26:35 NACHMITTAGS
Lieber Detlef,

Du hast Recht, es ist ein junger Spross. Ich hatte vor Freude, dass es mal einigermassen geklappt hat, die Bezeichnung glatt vergessen :D

Da ich die Schnitte nicht aufgeklebt hatte, habe ich einige unfreiwillig per Pipette entsorgt. Diesen hab ich nach dem Eindecken schnell fotografiert - "quick & dirty" sozusagen.

Paraffinschnitte sind eine Heidenarbeit :(

Fussballfreie Grüsse
Eckhard
Titel: Re: Japanische Sicheltanne
Beitrag von: Fahrenheit in Juli 18, 2010, 16:34:15 NACHMITTAGS
Lieber Eckhard,

nun bist Du also auch unter die "Paraffiner" gegangen, und das mit gutem Erfolg!

Kannst Du uns vielleicht ein wenig zu Deiner Technik verraten? Du schreibst, dass Du die Schnitte nicht aufgeklebt hast - hast Du mit Deinem Tischmikrotom geschnitten und wie dick ist der Schnitt?

Herzliche Grüße
Jörg
Titel: Re: Japanische Sicheltanne
Beitrag von: Eckhard in Juli 18, 2010, 16:58:41 NACHMITTAGS
Lieber Jörg,

ich bin wie folgt vorgegangen:

AFE 24h
Isopropanol 100% 6h
Isopropanol 100% 62° 6h
Gemisch aus flüssigem Paraffin und Isopropanol 100% 1:1 12 h
Abdampfen des Isopropanols 3 Tage
Überführen in reines Paraffin 1 Tag (3x wechseln)
Giessen eines Blöckchens
Gefriertruhe

Geschnitten bei -10° Paraffintemperatur mit einem Zylindermikrotom, 8 µm Schnittdicke.

Schnitte ins Streckbad (40°), mit dem Objektträger rausgefischt, getrocknet.
Xylol (um das Paraffin zu entfernen) 20 Minuten (2 x wechseln)
Isopropanol 100% 5 Minuten (2 x wechseln)
Aqua dest. 10 Minuten (2x wechseln)
Etzold Grün 8 Minuten, erwärmt auf 50°
Auswaschen mit Aqua Dest.
Isopropanol 100% 5 Minuten (3 x wechseln)
Euparal

Alles in allem eine Sauarbeit! Da lob ich mir die Möhre!

Herzliche Grüsse
Eckhard