Hallo Forum,
nach längerer Pause erstellte ich Schnitte aus dem Stengel der Schafgarbe. Diese wurden in FAE-Lösung fixiert. Anschließend absteigende Alkoholreihe ( Brennspiritus ) 70-50-30 % und 2 x Wasser.
Färbung Astrablau 3 Minuten, 2 x waschen, Färbung Safranin 5 Minuten. Anschließend Differenzierung mit Brennspiritus unter dem Stereomikroskop bis sich unverholzte Teile blau zeigen.
Nach 30 Minuten und mehrmaligem Wechseln des Brennspiritus habe ich abgebrochen. Anschließen 3 mal waschen in Iso, 2 mal in Xylol und Einschluß mit Malinol.
Warum hat die Differenzierung nicht funktioniert ? Liegt es daran, dass Brennspiritus statt Ethanol verwendet wurde ? Zum Vergleich eine Etzold FCA Färbung. Die Bilder wurden nachträglich nicht bearbeitet.
Bild 1: Safranin-Astrablau Färbung
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures002/44333_24199139.jpg)
Bild 2: Etzold FCA Färbung
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures002/44333_15219448.jpg)
Gruß aus Kronach
Ludger Benning
Hallo Ludger,
Hast du das Färbeset von mir? Dann hättest du eigentlich Salzsäure-Alkohol dazu haben müssen, weil das Färbeset so von mir zusammengestellt ist. Nach der Vorschrift, die bei Aisner aufgeführt wird:
Mikroskopische Färbemethoden Botanik
Astrablau-Safranin-Färbung
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Benötigte Chemikalien :
Astrablau FM (C.I. 48048), Safranin O (C.I.50240), Weinsäure, Salzsäure, Ethanol
Bemerkung :
Literatur :
BoMT S.129
Arbeitsablauf :
1. Schnitte in Aqua dest. spülen
2. Astrablaulösung 5 min.
3. Auswaschen mit Aqua dest.
4. Safraninlösung 5 min
5. 70%iger Ethanol 5 min
6. Salzsäurealkohol bis alle Zellulosewände rein blau und verholzte Zellwände rot erscheinen.
7. Gründlich Auswaschen in 90%igem Ethanol
8. entwässern, Intermedium, Harzeinschluß
Ergebnis :
Verholzte Zellwände rot, Zellulosewände blau.
Ansätze :
• Astrablaulösung: 0.5g Astrablau werden in 100ml 2%iger wäßriger Weinsäurelösung gelöst.
• Safraninlösung: 1g Safranin O werden in 100ml Aqua dest. gelöst.
• Salzsäurealkohol: 100ml 70%iger Ethanol werden mit 0.5ml konz. Salzsäure versetzt.
Hallo Klaus,
nein, die Farblösungen habe ich selber hergestellt. Sie entsprechen der von Dir genannten Rezeptur. Entnommen habe ich diese dem Buch:" Mikroskopisch-Botanisches-Praktikum" von Gerhard Wanner, Jahr 2004, Seite 21.
Ich werde es also einmal mit Salzsäurealkohol auf Brennspritusbasis versuchen. Ich hoffe ich bekomme konz. Salzsäure. ( Gibt es - so denke ich - noch frei verkäuflich im Baumarkt. )
Gruß aus Kronach
Ludger
Hallo Ludger,
Zitatdie Farblösungen habe ich selber hergestellt
schwerer Fehler aus meiner Sicht ;D ::) ;D
Der Salzsäurealkohol ist unkritisch, das Gefährlichste daran ist das Vergällungsmittel im Brennspiritus! ;)