Modifikation von diesen Beitrag: Ich dachte das 'Substantia nigra' angeschnitten zu haben aber das ist leider nicht korrekt.
'Purkinje' hat mich, zu recht, aufmerksam gemacht und weil dieses Forum kein Unsinn zeigen sollte ändere ich es gerne.
Heute mal ein Großschnitt durch die Ponsregion im Gehirn von ein Schwein.
Das Block war so groß das es gerade noch geschnitten werden könnte auf mein A&O 820 Mikrotom.
Um es auf zu ziehen musste ich erstmals auf suche nach größere OT und Deckgläser aber die sind über Ebay einfach zu bekommen.
Das Färben und entwässern, mit solche große OT, war ein folgendes Problem und die habe ich gelöst um die OT in Petrischalen zu legen. Nicht Ideal aber es geht.
(Alle Bilder sind gemacht, wie immer, am Leitz Orthoplan mit ein Moticam 2300 und Leitz 0.63x C-mount Adapter.)
Im Ponsregion liegen an einen bestimmten Stelle Neuronen mit ein Einschluss von viele Körnchen.
Es wurde in den 1700er Jahren von Félix Vicq-d'Azyr (http://de.wikipedia.org/wiki/F%C3%A9lix_Vicq_d%E2%80%99Azyr) entdeckt. Félix Vicq-d'Azyr war ein französischer Arzt, vergleichender Anatom und einer der bedeutendsten Neuroanatomen seiner Zeit.
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures003/104414_34021163.jpg)
Der Locus caeruleus (auch Locus coeruleus) ist ein Gebiet im Hirnstamm, welches auch der blaue Kern oder in die Englische Sprache ,,the blue spot" genannt wird.
Dies rührt von der bläulichen Färbung im nativen Gehirngewebe her und stammt von den bläulich-schwarzen Pigmenten in seinen Neuronen. Diese Pigmentgranula bestehen aus Neuromelanin, dieses entsteht bei der Synthese des Botenstoffs Noradrenalin in diesen Zellen.
Der Locus caeruleus ist mit anderen Kernen der Formatio retikularis maßgeblich am sog. aktivierenden System des Gehirns beteiligt.
Der Locus caeruleus erhält Fasern aus dem limbischen Kortex (u.a für emotionale Verarbeitung zustandig) und sendet auch wieder noradrenerge, aktivierende Fasern dorthin, wie auch zum Hippokampus (Kurzzeitgedächtnis) und zur Großhirnrinde.
Er ist an der Überwachung der internen und externen Umwelt des Gehirns und der Steuerung unserer Aufmerksamkeit, Wachheit und Stimmungslage beteiligt.
Der Pons ist hier Orange gefärbt,
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures003/104414_52690428.jpg)
Mein Schnitt kommt also aus die Region 5,7,8,9 und 29
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures003/104414_12823900.jpg)
Schnitt ist gefärbt mit Kernechtrubin nach Chroma und Anilin Blau/OrangeG/Eisessig.
Ein Stitch von 250 Bilder in Photoshop CS2 mit ein Leitz plan Fluotar 4x Objektiv.
Bild1,
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures003/104414_56017852.jpg)
Um mal weiter im Schnitt schauen zu können kann es mit Zoomify angeschaut werden. Bitte hier (http://zoom.ronaldschulte.nl/substantia_nigra/TemplateWebPage.htm) Klicken. Rechts und Links neben das vierte Ventrikel ist die Region zu erkennen wo sich die Neuronen aufhalten.
Bild 2,
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures003/104414_15030582.jpg)
Rechts und Links neben das vierte Ventrikel ist die Region zu erkennen wo sich die Neuronen aufhalten.
Leitz plan Fluotar 10x
Bild 3,
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures003/104414_12274123.jpg)
Leitz plan Fluotar 25x
Bild 4,
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures003/104414_33477028.jpg)
Leitz plan Apo 40x
Bild 5,
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures003/104414_30380881.jpg)
Stitch von 53 Bilder. Leitz plan Fluotar 10x
Bild 6,
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures003/104414_37656588.jpg)
In einem sagittalen Schnitt durch den Pons (Brücke) werden starke Faserzüge, welche zum Kleinhirn ziehen (Fibrae pontocerebellares) sichtbar.
Leitz plan Fluotar 16x, Färbung: Kresylechtviolett-Azetat.
Bild 7,
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures003/104414_416245.jpg)
Leitz plan Fluotar 16x, Färbung: Kresylechtviolett-Azetat.
Pfeilspitzen = Fasern der sog Pyramidenbahn vom Großhirn zum Rückenmark, längs geschnitten
Pfeilen = Fasern zum Kleinhirn quer getroffen
Bild 8,
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures003/104414_17066070.jpg)
Leitz plan Fluotar 25x, Färbung: Kresylechtviolett-Azetat.
Bild 9,
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures003/104414_28620256.jpg)
Großen Neuronen mit schönen Nissl Schollen.
Leitz plan Fluotar 16x, Färbung: Kresylechtviolett-Azetat.
Bild 10,
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures003/104414_32579819.jpg)
Leitz plan Apo 40x, Färbung: Kresylechtviolett-Azetat.
Bild 11,
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures003/104414_60704185.jpg)
Viel Spaß beim anschauen und nochmals, grüße aus Holland, Ronald
Lieber Ronald,
einfach fantastisch!
Warst Du auf dem Schlachthof mit Formalin und Skalpell im Gepäck?
Schöne Grüße
Jürgen
Hallo Ronald
Einfach nur faszinierend, die Qualitaet ist unglaublich ...
Liebe Gruesse
Gerhard
Heute zeigst Du uns einen ganz aussergewöhnlichen Schnitt !
Toller Beitrag, Ronald.
Herzliche Grüsse
Holger
@ Allen,
Ja den Schnitt ist außergewöhnlich und es wunderte mich auch das so ein Großen Block sich so außergewöhnlich einfach schneiden ließ.
Habt ihr das Zoomify Bild auch Probiert? Lauft es am Computer gut?
Grüße Ronald
Hallo Ronald,
der Schnitt und das Photo sind perfekt.
Zoomify funktioniert auf meinem Rechner (Win XP, Firefox als Browser) problemlos und beeindruckend.
Viele Grüße
Rainer
Lieber Ronald,
vielen Dank für Deinen spannenden Beitrag und die tollen Aufnahmen! Ein wirklich gelungener Schnitt!
Für mich besonders interessant sind die Aufnahmen 7 bis 9 mit den längs getroffenen Axonen.
Herzliche Grüße
Jörg
Hallo Ronald,
die Qualität deiner Schnitte und Färbungen sind immer sehr beeindruckend- Gratulation hierzu.
Zur Neuroanatomie habe ich jedoch einige Anmerkungen (s. PM).
Beste Grüße
Stefan
Wow Ronald! Da bekomme ich langsam wieder Lust auf die Lichtmikroskopie. Bei so vielen TEM/REM- Bildern in Graustufen habe ich diese tollen Farben fast vergessen.
Die Färbung ist aber auch wirklich gelungen, keine einfache H.-E.-Färbung :-)
Bei so einem großen Block hätte ich auch nicht mit einem so tollen Ergebnis gerechnet.
Viele Grüße,
Carsten
Wichtige Modifikation von diesen Beitrag.
Ronald
Hätte ich noch vergessen: Mit dank an 'Purkinje'!
Ich finde es nur gut das auch Fachleute mitlesen und Reagieren auch wenn irgendwas mal nicht stimmt.
Grüße Ronald
Ich habe ein weiteren Schnitt nochmal gefärbt nach Mallory 1900.
Das Granulat wird hier noch etwas Besser sichtbar.
Eine Versilberung folgt später nochmal.
Arbeitsablauf :
- Kernfärbung in 0.1%igem Säurefuchsin, 6 min.
- Spülen in Aqua dest.
- Fixieren und differenzieren in 2%iger Molybdatophosphorsäure, 7 min.
- Waschen in Aqua dest.
- Mallory-Lösung, 7 min.
- Spülen in Aqua dest.
- Differenzieren in 96%igem Ethanol
- Entwässern in Isopropanol 100% 2x
- Xylol 2x
- Einschlußharz (ich nehme gerne Depex)
Mallory-Lösung : 0.5g Anilinblau, 2g Orange G, 2g Oxalsäure in 100ml Aqua dest. kochen und filtrieren. (Die 1936 vorgeführte Färbung ist mit Wolframatophoshorsäure ausgestattet).
Leitz plan Fluotar 25x am mächtigen Leitz Orthoplan. Kamera: Moticam 2300.
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures003/110736_52153285.jpg)
Leitz plan Fluotar 25x am mächtigen Leitz Orthoplan. Kamera: Moticam 2300.
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures003/110736_57909914.jpg)
Leitz plan Fluotar 25x am mächtigen Leitz Orthoplan. Kamera: Moticam 2300.
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures003/110736_25496253.jpg)
Grüße Ronald
Hallo Ronald
Ich kenne mich in Histologie nicht gut aus, aber deine Schnitten sind sehr beeindruckend, und alles gut dokumentiert.
Herzlichen Gruss
Jan
Hallo Ronald,
KLASSE FÄRBUNG!
Da sieht man förmlich wieviel Substanz für den "noradrenergen Sturm" im Gehirn in diesen Granula bereitstehen!
Beste Grüße
Stefan