Liebe Kollegen,
wir hatten ja schon einmal die Frage nach der Haltbarkeit von Formaldehydlösung.
Dabei kann man ja die Lösung frisch aus Paraformaldehyd ansetzen oder die Formalinlösung einfrieren.
Kann man die handelsübliche 25%ige Glutaraldehydlösung ebenfalls einfrieren?
Danke,
Gruß aus Mülheim, Ralf
Hallo,
Ja, koennen Sie. Allerdings nicht in Glasampullen, diese koennen durch Eisbildung brechen.
Informationen zur Lagerung finden Sie hier
https://www.dow.com/webapps/lit/litorder.asp?filepath=microbial/pdfs/noreg/253-03305.doc&pdf=true
https://link.springer.com/article/10.1007/BF01444063
Ueblich ist die Lagerung bei 4C. https://www.emsdiasum.com/microscopy/products/chemicals/glutaraldehyde.aspx
Danke für die Info!
Gruß Ralf
Hallo allerseits!
Paavo mein Name. Ich kenne das Problem mit der Haltbarkeit von GA. Bei kleinen Einbettungen braucht man oft viel weniger als eine ganze Ampulle, und was tun mit dem Rest?
Was wir inzwischen machen, ist, die Ampulle mit Inertgas aufzufüllen, mit Parafilm zu verschließen und in ein Inertgas-gefülltes Schraubdeckelglas zu stellen, und so im Kühlschrank aufzubewahren.
Wir haben luxuriöserweise im Haus die Möglichkeit, UV-Spektroskopie zu machen, und konnten so die Qualität verschiedener Chargen überprüfen, nach der Methode von Prentoe)*.
Dazu misst man die Absorption bei 235 und 280nm Wellenlänge. Dann teilt man die Ergebnisse durcheinander. Wenn das Ergebnis unter 1 liegt, ist noch alles einigermaßen in Ordnung.
Bei diesem Test hatten wir auch eine unserer angebrochenen Ampullen nach 3 Monaten Lagerung im Kühschrank getested, und sie war noch gut (0,9). Wie Prentoe konnten auch wir feststellen, dass es vor allem enorme Schwankungen zwischen den Herstellern gibt. Laut der Publikation hat nach dem Hersteller der pH-Wert der Lösung den größten Einfluß, d.h., die Stammlösung aus der Ampulle ist gut haltbar, auch in angebrochenen Ampullen, das gepufferte Fixans (alkalischer) fast garnicht.
Anscheinend braucht man sich auch wegen Sauerstoffzutritt bei unverdünnter Stammlösung keine so großen Sorgen zu machen. Wir verdrängen ihn trotzdem (Wenn man schon eine Stickstoffleitung hat), aus gut eintrainierter Laborparanoia.
Viele Grüße und viel Erfolg
Paavo
)* Prentø P. Glutaraldehyde for electron microscopy: a practical investigation of commercial glutaraldehydes and glutaraldehyde-storage conditions. Histochem J. 31. März 1995;27(11):906–13.
Hallo Paavo,
danke für die Info,
ich würde Glutaraldehyd gerne für meine Semidünnschnitthistologie verwenden.
Ich hatte die 50%ige Lösung von Roth ins Auge gefasst und würde dann zu 10ml aliquotieren und einfrieren.
Habt Ihr Erfahrungen mit dem Einfrieren?
Gruß Ralf
Hallo Ralf,
Das 50%ige von Roth hat bei uns im Test auch gut abgeschnitten, da hatte der Rest in der Flasche nach 2 Jahren im Kühlschrank noch 1,4. Das ist für TEM vielleicht schon grenzwertig, aber für SEM und Lichmikroskopie sicher noch in Ordnung.
Wir nehmen schwerpunktmäßig die 25%igen 10ml-Ampullen von AGAR, da lohnt sich Wegfrieren nicht wirklich, insofern kann ich da leider keinen eigenen Erfahrungsbericht liefern, aber ich sehe eigentlich keinen Grund, warum es nicht funktionieren sollte.
Prentoe (1995) schreibt:
"The overriding parameter is the pH of the solution. Below pH 5, polymerization is very slow; above pH 7 it takes place fairly quickly, especially at elevated temperature. The suppliers' recommendations concerning storage of glutaraldehyde stock solutions are not consistent (see Table 1). The present paper demonstrates that, provided the stock glutaraldehyde solution is slightly acidic, it is remarkably stable even at room temperature (Table 4). In 4 weeks at room temperature, the 234/280 nm ratio increased from 0.14 to 0.21. Therefore, unless storage for several years is intended, refrigeration is more than adequate. [...] Concentrated, non-alkalinized commercial glutaraldehyde solutions may be stored for several months in the refrigerator, and indefinitely in the freezer. They tolerate storage at room temperature for several days. Diluted, alkaline glutaraldehyde fixative solutions
should be discarded after a few hours at room temperature. They may be stored in the refrigerator for at
most a week, but probably indefinitely in the freezer. "
Insofern würde ichs einfach mal machen. Schaden kann es sicher nicht, besser ist es bestimmt, und bequemer auf jeden Fall.
Viel Erfolg und viele Grüße
Paavo