Mikro-Forum

Foren => Mikrofoto-Forum => Thema gestartet von: Schrodt in August 19, 2018, 19:22:24 NACHMITTAGS

Titel: Auflicht-und Simultan-Fluoreszenz mit einer 3 W UV LED-Taschenlampe
Beitrag von: Schrodt in August 19, 2018, 19:22:24 NACHMITTAGS
Hallo Mikrofreunde,

2015 und 2016 habe ich im Mikrofoto-Forum mit mehreren Beiträgen Fluoreszenz-Verfahren und Wacker Fluoreszenz-Mikropräparate behandelt.
Der jetzige Erfahrungsbericht untersucht die Nutzung einer 3 W UV LED-Taschenlampe für die Auflicht-und Simultan-Fluoreszenz an einem Casuarina-und einem Klette-Mikropräparat.


Bild 1 : 3 W UV LED LED-Taschenlampe

(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures009/237657_14303791.jpg)


Bild 2 : Kosten der Taschenlampe mit Zubehör

(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures009/237657_49584532.jpg)


Aufnahmetechnik für die Mikrofotografie

Mikroskop Leitz Orthoplan • Objektive PL APO 16/0.40 UND 6.3/0.20 • Durchlicht-Dunkelfeld mit Halogenlampe und schiefes Auflicht mit einer Tank 007-536 3 W UV LED-Taschenlampe •
Zur Unterdrückung des störenden Rotlichts der Halogenlampe wurde ein Rot-Absorptionsfilter BG 38/4 mm auf das Glas der Durchlicht-Austrittsöffnung gelegt. Um eine saubere Trennung von
Anregungs-und Emissionslicht zu erreichen, wurde ein Anregungsfilter UG 1/2mm auf die Taschenlampe geklebt ( es gibt diese Taschenlampe auch mit Spektralfilter zum höheren Preis von
79,90 € statt 59,90 € ), der Sperrfilter K430 wurde als Filterschieber in das Stativ eingeschoben.


Bild 3 : Schema: Simultan-Fluoreszenz mit einer 3 W UV LED-Tachenlampe

(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures009/237657_11404313.jpg)


Die Durchlässigkeitskurven der Filter sind auf den nachstehenden Bildern 4 und 5 zu sehen.

Bild 4

(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures009/237657_2389992.jpg)

Bild 5

(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures009/237657_30880833.jpg)


Die für die Untersuchung verwendeten Wacker Mikropräparate haben eine 3 A - Färbung ( Acridinrot • Acriflavin • Astralblau ). Die Präparate sind bei Fluoreszenz-Untersuchungen aufgrund
der Farbstoffe gut für die Blau-Anregung geeignet, sie zeigen jedoch auch bei der UV-Anregung einige Strukturen, die bei der Simultan-Fluoreszenz Durchlicht-Dunkelfeld mit Halogenlicht
und schiefem Auflicht mit einer 3 W UV LED-Taschenlampe zu einer Optimierung des Dunkelfeldbildes genutzt werden können. Die optimierten Dunkelfeldbilder zeigen eine farblich differenzierte Darstellung der Strukturen mit sehr guter Auflösung. Die Auflösung des Dunkelfeldbildes ist ohnehin größer als die nach den Faustformeln für Hellfeld berechnete Auflösung.
Auflösung für das Objektiv PL APO 16/0.40:
Punktauflösung d < 0,333/A < 0,333/0.40 < 0,8 µm.  •   Linienauflösung AV > 3000 x A > 3000 x 0.4 > 1200 lp/mm.
Das Objektiv 16/0.40 hat nur einen kleinen, freien Arbeitsabstand von 1,19 mm. Die Leistung der 3 W UV LED-Taschenlampe ist jedoch trotz der flachen Anstrahlung des Anregungslichtes
ausreichend, um ein brauchbares Fluoreszenzbild zu erzeugen.
Das ebenfalls für die Untersuchung vorgesehene Objektiv PL APO 6.3/0.20 hat einen freien Arbeitsabstand von 9,2 mm und ermöglicht dadurch eine wesentlich steilere Anstrahlung des
Anregungslichtes. Die Vergrößerung für die Präparate war jedoch zu klein.


Mikrofoto 1 : Fluoreszenzbild Casuarina equisetifolia • Querschnitt • Ästchen vom Känguruhbaum

(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures009/237657_58154627.jpg)

Mikrofoto 2 : Optimiertes Dunkelfeldbild Casuarina

(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures009/237657_35529478.jpg)

Mikrofoto 3 : Fluoreszenzbild Casuarina

(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures009/237657_47422476.jpg)

Mikrofoto 4 : Optimiertes Dunkelfeldbild Casuarina

(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures009/237657_65273341.jpg)


Fazit:

Die Simultan-Fluoreszenz Durchlicht-Dunkelfeld und schiefes Auflicht mit einer 3 W UV LED-Taschenlampe ist geeignet, das gute Dunkelfeldbild der Wacker Mikropräparate noch weiter zu
optimieren. Das Verfahren ermöglicht mit relativ einfachen und preisgünstigen Mitteln Simultan-Fluoreszenz-Mikroskopie. Es ist jedoch kein Ersatz für Einrichtungen mit der wesentlich
effektiveren senkrechten Auflicht-Anregung, z.B. Leitz PLOEMOPAK, bei denen man auch mit Ölimmersion arbeiten kann.
Selbstverständlich kann man bei geeigneten Mikropräparaten auch Auflicht-Fluoreszenz mit UV-Anregung mittels der Taschenlampe ohne Durchlicht-Dunkelfeld machen, das zeigen die Mikrofotos 1, 3, 5 und 6.


Mikrofoto 5 : Fluoreszenzbild  Cuscuta auf Klette • Querschnitt

(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures009/237657_58961324.jpg)

Mikrofoto 6 : Ausschnitt aus Mikrofoto 5

(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures009/237657_1495183.jpg)


Viel Spaß beim Lesen und Anschauen.

Mit herzlichen Mikrogrüßen

Jürgen aus Hemer
Titel: Re: Auflicht-und Simultan-Fluoreszenz mit einer 3 W UV LED-Taschenlampe
Beitrag von: d65 in August 20, 2018, 18:04:26 NACHMITTAGS
Hallo Jürgen,

vielen Dank für die schönen Bilder - und die Anregung für die UV-Lampe. So was suche ich schon länger. Hast du beim Einsatz tatsächlich die Schutzbrille auf?

Besonders gut gefällt mir das "Schildkrötengesicht" in Mikrofoto 5.

Gruß
Steffen
Titel: Re: Auflicht-und Simultan-Fluoreszenz mit einer 3 W UV LED-Taschenlampe
Beitrag von: Rawfoto in August 20, 2018, 20:37:50 NACHMITTAGS
Danke Jürgen, toller Beitrag👍

Liebe Grüße

Gerhard
Titel: Re: Auflicht-und Simultan-Fluoreszenz mit einer 3 W UV LED-Taschenlampe
Beitrag von: Schrodt in August 21, 2018, 11:31:51 VORMITTAG
Hallo Steffen & Gerhard,

es freut mich, dass euch mein Beitrag gefällt. Dank dafür.

Lieber Steffen,

ich kann mit 85 Jahren zum Glück noch gut sehen. Möchte jedoch meine Augen durch die UV-Strahlung nicht strapazieren und setze daher bei der UV-Fluoreszenz immer die UV-Schutzbrille auf.
Bei der üblichen Mikroskopie mit Halogen-und Xenonlicht habe ich auch immer einen UV-Sperrfilter SCHOTT WG 360/2mm auf der Filterauflage der Lichtaustrittsöffnung.

Mit herzlichen Mikrogrüßen

Jürgen aus Hemer
Titel: Re: Auflicht-und Simultan-Fluoreszenz mit einer 3 W UV LED-Taschenlampe
Beitrag von: Schrodt in August 22, 2018, 15:31:58 NACHMITTAGS
Ein interessanter Versuch ! !

Mikrofoto 7 : Fluoreszenzbild mit Spiegel unter dem Mikropräparat.

(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures009/237756_23264094.jpg)

Mit herzlichen Mikrogrüßen

Jürgen aus Hemer
Titel: Re: Auflicht-und Simultan-Fluoreszenz mit einer 3 W UV LED-Taschenlampe
Beitrag von: Peter Reil in August 22, 2018, 16:24:45 NACHMITTAGS
Hallo Jürgen,

das Bild ist ungewöhnlich und wirklich toll! Super.

Freundliche Grüße
Peter
Titel: Re: Auflicht-und Simultan-Fluoreszenz mit einer 3 W UV LED-Taschenlampe
Beitrag von: Schrodt in August 24, 2018, 10:49:04 VORMITTAG
Hallo Peter,

vielen Dank für deine lobenden Worte. Ich habe mich darüber sehr gefreut.

Hallo Mikrofreunde,

es lohnt sich wohl meist bei schiefer Auflicht-Fluoreszenz mit einer UV-Taschenlampe einen Spiegel in Objektträger-Größe unter das Mikropräparat zu legen, wie zum Beispiel bei der Spiegelreflexmikroskopie mit Auflicht-Interferenzkontrast. Das Mikrofoto zeigt dann andere Farben und mehr Details.


Bild 6 : Spiegel

(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures009/237800_2389992.jpg)


Mikrofoto 8 : Fluoreszenzbild mit Spiegel zum Vergleich mit Mikrofoto 1 ohne Spiegel

(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures009/237800_30880833.jpg)


Mikrofoto 9 : Fluoreszenzbild mit Spiegel zum Vergleich mit Mikrofoto 3 ohne Spiegel

(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures009/237800_58154627.jpg)


Auch mit einer billigeren Taschenlampe z.B. von Taschenlampen Papst  " Tank 007 TK-566 3 W 395 nm 2017 er ( Preis 42,90 € ) " kann man sicherlich brauchbare
Fluoreszenz-Mikrofotos machen, wenn man mit einem Langpass-Sperrfilter z.B. SCHOTT OG 475/2 mm  oder Leitz K 470 arbeitet.


Es gibt auch z.B. bei Opsytec Dr. Gröbel professionelle, leistungsfähigere 5 W High-Power UV-LED Punktlichtqellen mit den Wellenlängen 365, 385, 395, 405 und 445 nm,
mit denen man sicherlich mit entsprechenden Sperrfiltern gute Fluoreszenz-Mikrofotos mit schiefer Auflicht-Beleuchtung + untergelegtem Spiegel machen kann, wenn man
keine Fluoreszenz-Einrichtung für senkrechtes Auflicht hat. Preise dafür habe ich jedoch bisher nicht angefragt.


Nachstehend die Bilder 7 + 8 mit OPSYTEC PRODUKT INFORMATIONEN.

(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures009/237800_35529478.jpg)

(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures009/237800_47422476.jpg)


Mit herzlichen Mikrogrüßen

Jürgen aus Hemer
Titel: Re: Auflicht-und Simultan-Fluoreszenz mit einer 3 W UV LED-Taschenlampe
Beitrag von: Schrodt in August 25, 2018, 16:52:03 NACHMITTAGS
Einige fluoreszierende Merkmale von der  10 €  Banknote.


Mikrofoto 9 :  PL APO 6.3/0.20/FAA 9,2 mm

(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures009/237850_28756230.jpg)[/url]


Mikrofoto 10 :  PL 2.5/0.08/FAA 11,8 mm

(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures009/237850_18961937.jpg)


Mikrofoto 11 :  PL APO 6.3/0.20/FAA 9,2 mm

(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures009/237850_47980820.jpg)


Mit herzlichen Mikrogrüßen

Jürgen aus Hemer
Titel: Re: Auflicht-und Simultan-Fluoreszenz mit einer 3 W UV LED-Taschenlampe
Beitrag von: ds0511 in August 25, 2018, 18:47:04 NACHMITTAGS
Hallo Jürgen,

die Opsytec UV-LED wird sicher den Preisrahmen von o.g. 59,- € für die Tank 007 - TK566 sprengen, oder?

Und nicht zu vergessen: die Bilder sind wirklich etwas Besonderes. Mir gefällt das "Schildkrötengesicht" mit Spiegel unter dem OT am allerbesten.

Viele Grüße,
Detlef
Titel: Re: Auflicht-und Simultan-Fluoreszenz mit einer 3 W UV LED-Taschenlampe
Beitrag von: Schrodt in August 26, 2018, 16:29:38 NACHMITTAGS
Hallo Detlef,

schön, dass dir die Mikrofotos gefallen. Danke für deine Mitteilung.

Die professionelle Opsytec 5 W High-Power UV-LED solo P mit Strahlprofil High-Power wird mit einem 12 V Steckernetzteil betrieben. Sie wird daher viel teurer sein, als die einfache  3 W UV LED-Taschenlampe mit Batteriebetrieb.  Ich habe den Preis dafür nicht angefragt, da ich nur gelegentlich UV-Fluoreszenz mache und die preiswerte Lösung mit schiefem Auflicht mittels der 3 W UV LED-Taschenlampe mit
Batteriebetrieb auch brauchbare Mikrofotos ermöglicht, die für meine Bedürfnisse ausreichen. Bei der Auflicht-Fluoreszenz arbeite ich sonst gut mit dem Leitz PLOEMOPAK mit den Anregungsbereichen BLAU und GRÜN.

Mit herzlichen Mikrogrüßen

Jürgen aus Hemer
Titel: Re: Auflicht-und Simultan-Fluoreszenz mit einer 3 W UV LED-Taschenlampe
Beitrag von: Schrodt in August 28, 2018, 12:00:52 NACHMITTAGS
Hallo Mikrofreunde,

den Beitrag abschließend zum Vergleich der Fluoreszenz-Verfahren noch ein interessantes Motiv von dem Wacker Präparat " Cuscuta an Klette " mit 3 A-Färbung.


Mikrofoto 12 : Fluoreszenzbild • PL APO 16/0.40 • Präparat auf Spiegel • FAA 1,19 mm • Schiefes UV - Auflicht • ISO 400 • 1/6 s. ( ohne Spiegel 1/2 s ! )

(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures009/237979_31864982.jpg)


Fazit :

Die im Beitrag gezeigten Verfahren ermöglichen auch ohne teure Fluoreszenz-Auflichteinrichtungen mit preiswerten Mitteln eine brauchbare Fluoreszenz-Mikrofotografie.

Bei transparenten Präparaten mit fluoreszierenden Strukturen kann man mit der Simultan-Fluoreszenz • Durchlicht-Dunkelfeld mit der Halogenlampe 12 V 100 W und schiefes Auflicht mit der 3 W UV LED-Taschenlampe • das Dunkelfeldbild optimieren, so dass die Strukturen farblich differenziert und mit sehr guter Auflösung dargestellt werden.

Auch ohne Durchlicht-Dunkelfeld kann man bei diesen Präparaten, wenn man einen Spiegel unter das Präparat legt, mit schiefem Auflicht mittels der 3 W UV LED-Taschenlampe brauchbare, farbige und gut
aufgelöste Fluoreszenz-Bilder machen. Durch den Spiegel wird außerdem die Belichtungszeit meist erheblich verkürzt !

Bei opaken Präparaten mit fluoreszierenden Elementen reicht die Beleuchtung mit schiefem Auflicht mittels der 3 W UV LED-Taschenlampe ebenfalls noch aus, um brauchbare Fluoreszenz-Bilder zu erzeugen.

Die UV LED-Taschenlampe gibt ein sehr konzentriertes Licht ab, so dass auch ohne Anregungsfilter SCHOTT UG 1/2 mm brauchbare Fluoreszenz-Mikrofotos möglich sind.


Mit herzlichen Mikrogrüßen

Jürgen aus Hemer
Titel: Re: Auflicht-und Simultan-Fluoreszenz mit einer 3 W UV LED-Taschenlampe
Beitrag von: knipser009 in August 28, 2018, 14:11:41 NACHMITTAGS
hallo Jürgen

vielen Dank für diese schöne und inspirierende Serie
Titel: Re: Auflicht-und Simultan-Fluoreszenz mit einer 3 W UV LED-Taschenlampe
Beitrag von: Klaus Herrmann in August 28, 2018, 16:45:44 NACHMITTAGS
Hallo Jürgen

das ist ja eine tolle Anregung. Ich habe eine Frage, weil ich mir nicht sicher bin ob ich es richtig verstanden habe:
kann man wirklich die 5 verschiedenen Anregungswellenlängen mit dieser Lichtquelle erhalten. Wie schaltet man dann um. Und sind die Intensitäten gleich hoch?
Titel: Re: Auflicht-und Simultan-Fluoreszenz mit einer 3 W UV LED-Taschenlampe
Beitrag von: Schrodt in August 28, 2018, 17:22:57 NACHMITTAGS
Hallo Wolfgang,

es freut mich, das dir mein Beitrag gefällt und dich eventuell zu weiteren Taten anregt.

Hallo Klaus,

ich habe die Informationen zu der Punktlichtquelle so verstanden, dass man dieses Gerät jeweils für " eine " der angebotenen Lichtwellenlängen erhalten kann. Umschalten kann man sicherlich nicht !
Bei der Optik kann man unter 4 Strahlprofilen auswählen. Umschalten kann man sicherlich auch nicht ! Austauschen ja !
Zur besseren Information füge ich noch Produktinformationen über Technische Daten, Sicherheitshinweise, Strahlprofile & Optik-Optionen an. ( Bilder 9 + 10 )


(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures009/237995_28913585.jpg)


(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures009/237995_44606316.jpg)


Mit herzlichen Mikrogrüßen

Jürgen aus Hemer
Titel: Re: Auflicht-und Simultan-Fluoreszenz mit einer 3 W UV LED-Taschenlampe
Beitrag von: Schrodt in August 31, 2018, 14:38:05 NACHMITTAGS
Hallo Mikrofreunde,

doch noch ein interessanter Fluoreszenz-Versuch mit einem Anthracen-Schmelzpräparat, welches ich nach einem Mikrofotografie-Kurs bei Kage vor über 25 Jahren mit zwei Diagläsern angefertigt habe ! !

Mikrofoto 13:

Anthracen-Kristalle • PL APO 6.3/0.20/FAA 9,2 mm • VW 3 x • Präparat auf Spiegel • Schiefes Auflicht mit 3 W UV LED-Taschenlampe 365 nm • kein Anregungsfilter UG1/2 • Sperrfilter K 430 • ISO 100 •
1/20 s.


(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures009/238107_17043416.jpg)


Mit herzlichen Mikrogrüßen

Jürgen aus Hemer
Titel: Re: Auflicht-und Simultan-Fluoreszenz mit einer 3 W UV LED-Taschenlampe
Beitrag von: Schrodt in September 01, 2018, 17:12:29 NACHMITTAGS
Hallo Mikrofreunde,

im April 2016 habe ich in einem Beitrag über die Primärfluoreszenz von Kürbiskernöl u.a. berichtet. Siehe nachstehender Link:

https://www.mikroskopie-forum.de/index.php?topic=25714.msg192882#msg192882

Die Verfahren waren etwas umständlich. Mit der UV LED-Taschenlampe geht es jetzt ganz einfach !

Für die Versuche habe ich jetzt folgende Öle verwendet:

•  Steirisches Kürbeskernöl, Ölmühle Ersterer GmbH, 8073 Feldkirchen

•  Bio Bratöl , hoch erhitzbar, High Oleic Sonnenblumenöl, Bio Zentrale Naturprodukte GmbH, 84384 Ulbering

Präparat :  Einen Tropfen Öl auf den Objektträger tropfen und mit einem Deckglas abdecken.


Mikroskop Leitz Orthoplan • PL APO 6.3/0.20/FAA 9,2 mm • VW 1 x • Präparat auf Spiegel • Schiefes Auflicht mit 3 W UV LED-Taschenlampe 365 nm • kein Anregungsfilter UG1/2 • Sperrfilter K 430


Mikrofoto 14 :  Fluoreszenzbild Kürbiskernöl • ISO 80 • 0,2 s

(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures009/238140_47980820.jpg)


Mikrofoto 15 :  Fluoreszenzbild Bio Bratöl ( Sonnenblumenöl ) • ISO 100 • 0,8 s

(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures009/238140_11653293.jpg)


Viel Spaß beim Anschauen.

Jürgen aus Hemer


Ergänzung:  Bertolli Natives Olivenöl Extra, 50028 Tavarnelle Val di Pesa (FI) Italien

Mikrofoto 16 : Fluoreszenzbild Olivenöl • ISO 100 • 0,8 s

(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures009/238140_41149443.jpg)
Titel: Re: Auflicht-und Simultan-Fluoreszenz mit einer 3 W UV LED-Taschenlampe
Beitrag von: Schrodt in September 03, 2018, 16:01:15 NACHMITTAGS
Hallo Mikrofreunde,

zur Prüfung der Echtheit von Bernstein gibt es verschiedene Methoden. Eine davon ist die sogenannte " Fluoreszenz-Methode ". Echter Bernstein leuchtet unter UV-Bestrahlung ( Wellenlänge 320 - 380 nm )
in unverwittertem Zustand " blau " und in verwittertem Zustand in einem " matten Olivgrün ". Fälschungen aus Plastik leuchten jedoch nicht !

Nachstehend ein " Fluoreszenzbild " von einem klaren, goldgelben Bernsteinanhänger meiner Frau.

Mikrofoto 17 : Bernsteinanhänger auf Spiegel • PL APO 6.3/0.20/ FAA 9,2 mm • ISO 80 • 1/13 s

(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures009/238213_30880833.jpg)



Mit herzlichen Mikrogrüßen

Jürgen aus Hemer
Titel: Re: Auflicht-und Simultan-Fluoreszenz mit einer 3 W UV LED-Taschenlampe
Beitrag von: Schrodt in September 06, 2018, 11:20:47 VORMITTAG
Liebes Forum,

das Interesse an meinem Fluoreszenz-Beitrag hat mich veranlasst, nach den gezeigten Möglichkeiten mit der einfachen UV-Fluoreszenz-Ausrüstung zum Schluss auch die Grenzen zu den meisterhaften
Fluoreszenz-Mikrofotos des "Wacker Gänseblümchen Präparates"  von Frank Fox und Michael (sushidelic) aufzuzeigen. Diese haben mit großem, auf die richtigen Anregungs-Wellenlängen abgestimmten
Equipment und stärkeren Vergrößerungen fotografiert. Siehe nachstehende Links von ihren Beiträgen:


https://www.mikroskopie-forum.de/index.php?topic=32046.msg237213#msg237213

https://www.mikroskopie-forum.de/index.php?topic=32017.msg237018#msg237018


Ich habe auch ein Wacker Gänseblümchen Präparat mit folgenden Daten:

TS = Querschnitt • Schnittdicke 8 µm • Färbung W-RAA ! • Eindeckmittel PERTEX • Jahr 2009.

Die Fluorochrome der RAA-Färbung reagieren auf folgende Fluoreszenz-Anregungen besonders gut:
R = Rhodamin B : Grün • A = Acriflavin : Blau • A = Astralblau : Blau.

Die UV-Anregung mit der Taschenlampe ist daher für dieses Präparat nicht gut geeignet !

Trotzdem habe ich, um die Grenzen der einfachen UV-Fluoreszenz aufzuzeigen, die nachstehenden Mikrofotos gemacht.


Mikrofoto 18 :  DL - DF  + Schiefes Auflicht mit der UV LED-Taschenlampe • PL APO 16/0.40/FAA 1,19 mm • VW 1.6 x • kein Anregungsfilter • Sperrfilter K 430 • ISO 80 • 1,0 s.

(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures009/238319_23264094.jpg)


Mikrofoto 19 :  Schiefes UV-Auflicht mit der UV LED-Taschenlampe • PL APO 16/0.40/FAA 1,19 mm • VW 1.6 x • Präparat auf Spiegel • kein Anregungsfilter • Sperrfilter K 430 • ISO 200 • 1,0 s.

(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures009/238319_14303791.jpg)[/url]


Mikrofoto 20 :  ISO 200 • 0,5 s • sonst wie Mikrofoto 19.

(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures009/238319_49584532.jpg)


Bei dem Vergleich mit den meisterhaften Fluoreszenz-Mikrofotos kann man für die einfache Fluoreszenz-Ausrüstung folgende Nutzungsgrenzen deutlich erkennen:

•  Das Mikropräparat muss bei der Sekundär-Fluoreszenz eine für die UV-Anregung geeignete Färbung haben.

•  Das Mikropräparat muss bei der Primär-Fluoreszenz die Eigenschaft haben, bei UV-Anregung Fluoreszenzlicht zu emittieren.

•  Das Mikropräparat muss für schwache Vergrößerungen geeignet sein, da wegen des erforderlichen freien Arbeitsabstandes für das schiefe UV-Auflicht mit der Taschenlampe nur relativ schwache Objektive
   z.B. 6.3/0.20 oder 16/0.40 benutzt werden können.


Nach meiner Ansicht lohnt sich trotz der aufgezeigten Nutzungsgrenzen der Kauf einer UV LED-Taschenlampe, da man mit ihr doch, wie die Beispiele zeigen, in einigen Bereichen brauchbare Fluoreszenz-
Mikrofotos machen kann. Mit geringen Kosten kann man sich neue Mikro-Bereiche erschließen.


Mit herzlichen Mikrogrüßen

Jürgen aus Hemer
Titel: Re: Auflicht-und Simultan-Fluoreszenz mit einer 3 W UV LED-Taschenlampe
Beitrag von: Schrodt in September 06, 2018, 17:40:18 NACHMITTAGS
Neuer erfolgreicher Versuch mit einem starkem Tockenobjektiv ! !

Auch bei ganz flacher UV-Einstrahlung bekommt man bei einem starken Objektiv mit kleinem freien Arbeitsabstand bei einem geeigneten Mikropräparat noch ein brauchbares Fluoreszenzbild.

Mikrofoto 21 :  Wacker Präparat Klette • sehr flaches UV-Auflicht mit der UV LED-Taschenlampe • PL APO 40/0.75/FAA 0,45 mm • VW 1.0 x • Präparat auf Spiegel • kein Anregungsfilter • Sperrfilter K 430 •
                      ISO 80 • 0,8 s.

(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures009/238340_30376100.jpg)


Mit herzlichen Mikrogrüßen

Jürgen aus Hemer
Titel: Re: Auflicht-und Simultan-Fluoreszenz mit einer 3 W UV LED-Taschenlampe
Beitrag von: Schrodt in September 07, 2018, 11:07:55 VORMITTAG
Neuer erfolgreicher Versuch mit einem Immersionsobjektiv ! ! !

Mikrofoto 22 :  Wacker Präparat Klette • flaches UV-Auflicht mit der UV LED-Taschenlampe • PL APO 40/1.00/OEL/FAA 0,22 mm • VW 1.0 x • Präparat auf Spiegel • kein Anregungsfilter • Sperrfilter K 430 •
                      ISO 80 • 0,5 s.

(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures009/238385_45523402.jpg)


Fazit:

bei einem geeigneten transparenten Mikropräparat bekommt man auch bei starken Trockenobjektiven oder sogar bei Immersionsobjektiven, wenn das Präparat auf einem Spiegel liegt, trotz der flachen UV-Bestrahlung und der sehr kleinen freien Arbeitsabstände mit der UV LED-Taschenlampe noch ein brauchbares Fluoreszenzbild.
Es ist eine erhebliche nicht erwartete Nutungserweiterung, dass bei dem Auflicht-Verfahren mit der UV LED-Taschenlampe bei transparenten Mikropräparaten auch diese Objektive eingesetzt werden können.

Nach meiner Ansicht hat die nicht erwartete Nutzungserweiterung vereinfacht folgende Gründe:

• Durch die Lage des Mikropäparates auf dem Spiegel entsteht ein transparenter freier Raum zum Objektschnitt in Dicke des Objektträgers ( ca. 1 mm ).

• der Spiegel reflektiert das eingestrahlte UV-Licht.

• Dadurch entsteht eine Simultane Auflicht-Fluoreszenz / Durchlicht-Fluoreszenz.

• Durch die Simultane-Beleuchtung verkürzen sich die Belichtungszeiten bei der Mikrofotografie.


Herzliche Mikrogrüße

Jürgen aus Hemer


Ergänzung:  Mikrofoto 23 :  Zur Absicherung des Verfahrens • Aufnahmebedingungen wie Mikrofoto 22


(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures009/238385_35287174.jpg)
Titel: Re: Auflicht-und Simultan-Fluoreszenz mit einer 3 W UV LED-Taschenlampe
Beitrag von: mikropit in Oktober 28, 2019, 09:29:30 VORMITTAG
Hallo Jürgen, ich wurde von Günther Dorn auf den Faden aufmerksam gemacht. Das ist ja eine ganz tolle Arbeit von Dir. Was mich interessiert, sind die Belichtungszeiten. Ich kann halt mit meiner Kamera max. 2 sec belichten. Den Tip mit dem Spiegel probiere ich gleich mal aus. Vor UV habe ich Angst, da ich schon 2 Augen OPs hinter mir habe. Ich arbeite nur mit Blaulicht mit 455 nm.
Vielen Dank
Peter
Titel: Re: Auflicht-und Simultan-Fluoreszenz mit einer 3 W UV LED-Taschenlampe
Beitrag von: Schrodt in Oktober 28, 2019, 10:25:55 VORMITTAG
Hallo Peter,

ich freue mich, dass dir der Beitrag gefällt.
Die Belichtungszeiten betragen bei der Kompaktkamera Canon PowerShot G11 bei ISO 80 - 400 maximal 1 s. 

Beispiel Mikrofoto 7:  ISO 100, o,8 s.

Ich trage beim Arbeiten mit UV-Licht immer eine Schutzbrille !

Viel Spaß beim Mikroskopieren.

Mit herzlichen Mikrogrüßen

Jürgen aus Hemer
Titel: Re: Auflicht-und Simultan-Fluoreszenz mit einer 3 W UV LED-Taschenlampe
Beitrag von: reblaus in Oktober 28, 2019, 11:22:15 VORMITTAG
Hallo Jürgen -

wenn Du jetzt auf 1 sec kommst, dann würde es sich lohnen mal mit einer richtigen Filterkombination zu arbeiten und den Lichtverlust halt zu akzeptieren. Nachdem auf Deinen ersten Bildern ja knackige Fluoreszenz vorherrscht, zeigen die letzten mit dem Planapo 40 anscheinend einen großen Blaulichtanteil des Anregungslichtes, sonst müsste ja der Hintergrund auch dunkel sein. Oder gibt es da eine andere Erklärung, die ich übersehen habe?

Viele Grüße

Rolf
Titel: Re: Auflicht-und Simultan-Fluoreszenz mit einer 3 W UV LED-Taschenlampe
Beitrag von: Schrodt in Oktober 28, 2019, 16:14:55 NACHMITTAGS
Hallo Rolf,

da ich den Anregungsfilter  Schott UG 1/2 nicht verwendet habe und das Zimmer auch nicht gut abgedunkelt war, vermute ich erstmal , dass der Blaustich der Fotos von der
Überlagerung des Anregungslichtes mit dem Tageslicht entstanden ist. Ich werde das in den nächsten Tagen mal nachprüfen.

Mit herzlichen Mikrogrüßen

Jürgen aus Hemer