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Foren => Mikrofoto-Forum => Thema gestartet von: Muschelbluemchen in April 13, 2011, 21:35:22 NACHMITTAGS

Titel: Calendula officinalis - Blüte quer, gefärbt mit Wacker 3A *
Beitrag von: Muschelbluemchen in April 13, 2011, 21:35:22 NACHMITTAGS
Hallo Mikrofreunde

Schon vor Jahren habe ich Ringelblumenblüten http://de.wikipedia.org/wiki/Ringelblume  in Paraffin eingeschlossen,
nun habe ich die Blöcke wieder hervor geholt und auf einem alten Rotationsmikrotom (ein Kosmos Rotationsmikrotom
aus den 20er Jahren des vorigen Jahrhunderts) geschnitten.
Das Mikrotom ist somit schon fast 100 Jahre alt - im Mikrokosmos, Jahrgang 21 1927/28 Seite 162 wird das "Neue Kosmos Mikrotom"
beschrieben, dort ist auch das Alte abgebildet, welches ich zum Schneiden verwende!
Schnittdicke ungefähr 10Mikrometer:
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures002/62951_55774706.jpg)
Fixiert wurden die Blüten in Methanol/Glutaraldehyd/Eisessig (~1 Woche)
dann in einer aufsteigenden Alkoholreihe entwässert, über Isopropanol in Terpineol und von da in Paraffin (Schmelzpunkt 51-53)
Die im Wasserbad gestreckten Paraffinschnitte wurden auf mit Eiweiß/Glycerin beschichtete Objektträger aufgebracht und nach Entfernen
des Paraffins -> Isopropanol -> Alkohol96% -> Alkohol50% -> Acridinrot/Acriflavin (Lösung von Klaus Herrmann, auch hier im Forum) 10 Minuten
gefärbt, für 5 Minuten mit Safranin gefärbt, im Dest.H20 abgespült, 15 Sekunden mit Astrablau/Acriflavin gefärbt. Mit Leitungswasser gespült, in 96%Äthanol (sehr kurz - eigentlich nur eingetaucht), einige Sekunden in Isopropanol und dann in Xylol (trotzdem ist das meiste Acriflavin
im Alkohol hängen geblieben  :- )
Das Originalbild kann hier runtergeladen werden: https://picasaweb.google.com/lh/photo/xqw1QEAN7bk92bvyNxD3UA?feat=directlink
Dort stellt google auch eine Zoomfunktion zur Verfügung, somit kann man da relativ leicht die Details der Aufnahme studieren.

Das Bild selbst ist ein Stitch aus 108 Einzelbilder, die Einzelbilder habe ich am Motic BA310 erstellt mit dem 4er Objektiv und der c-mount Kamera
DFK 72AUC02.
Das zusammengesetzte Bild wurde nachträglich noch im gimp aufbereitet.

mit herzlichen Mikrogrüßen
Leopold


Titel: Re: Calendula officinalis - Blüte quer, gefärbt mit Wacker 3A
Beitrag von: Mila in April 13, 2011, 22:28:26 NACHMITTAGS
Lieber Leopold,

superklasse! Genial! Und noch dazu eine meiner Lieblingspflanzen :)

Herzliche Grüße
Mila

Nachtrag: die Zoom-Funktion ist der Hammer: Drüsenhaare, Pollensäcke,... alles sehr gut zu sehen!
Titel: Re: Calendula officinalis - Blüte quer, gefärbt mit Wacker 3A
Beitrag von: Fahrenheit in April 13, 2011, 22:44:41 NACHMITTAGS
Lieber Leopold,

das ist ein wirklich sehr schöner Schnitt mit einer interessanten Färbung! Vielleicht kannst Du uns noch ein paar Detailaufnahmen zeigen!

Schön, dass Dein altes Mikrotom-Schätzchen sich von seinem Alter so garnichts anmerken lässt.  :)

Herzliche Grüße
Jörg
Titel: Re: Calendula officinalis - Blüte quer, gefärbt mit Wacker 3A
Beitrag von: Rawfoto in April 13, 2011, 23:28:01 NACHMITTAGS
Hallo Leopold

Extraklasse,einfach topp ... Auch ich wuerde ein paar Ausschnitte gerne ansehen koennen, wenn Du so etwas fotografiert hast wuerde ich mich freuen die Bilder sehen zu koennen ...

:-)

Gerhard
Titel: Re: Calendula officinalis - Blüte quer, gefärbt mit Wacker 3A
Beitrag von: Holger Adelmann in April 14, 2011, 12:00:06 NACHMITTAGS
Ganz hervorragend, lieber Leopold.

Solche tollen Bluetenquerschnitte kenne ich sonst nur vom 'Altmeister' Robin Wacker!

Danke fuers zeigen.

Herzliche Gruesse
Holger

PS: Was macht die Foto-Anpassung??
Titel: Re: Calendula officinalis - Blüte quer, gefärbt mit Wacker 3A
Beitrag von: Muschelbluemchen in April 17, 2011, 21:08:16 NACHMITTAGS
Hallo

Danke für das Lob!
Hier eine Detailaufnahme:
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures002/63192_4527930.jpg)
Ist ein Stitch aus ungefähr 40 Fotos.
Eigentlich ein Experiment - das Bild habe ich heftig mit gimp nachbearbeiten müssen um es betrachtenswert zu bekommen.
Die Aufnahmen habe ich am Lomo Biolam mit dem 10/0.3 Apochromat kombiniert mit einem PK12.5/16 Okular von Zeiss Jena erstellt.
Die Fotos wurden durch das Okular aufgenommen unter Zuhilfenahme des Okularadapters von Motic siehe: http://www.tedpella.com/cameras_html/camera1.htm
Doch das PK-Okular harmoniert nicht so richtig mit dem Apochromaten von Lomo, daher die Notwendigkeit das Bild im gimp zu verschönern.

@Holger
ZitatPS: Was macht die Foto-Anpassung??
Diese Aufnahme stellt einen ersten Versuch dar etwas publizierbares damit zu produzieren - werde aber noch genauer darüber berichten, wenn ich genug Erfahrung
damit gesammelt habe!

mit herzlichen Mikrogrüßen
Leopold
Titel: Re: Calendula officinalis - Blüte quer, gefärbt mit Wacker 3A
Beitrag von: Rawfoto in April 17, 2011, 22:19:44 NACHMITTAGS
Hallo Leopold

Das Bild spricht fuer die Qualitaet des Praeparats, die Qualitaet des Fotos wirkt auf mich ungleichmaessig. Das liegt aber eher am Foto und nicht am Objekt ...

Es sind wirklich schoene Details zu erkennen, echt faszinierend!

:-)

Gerhard
Titel: Re: Calendula officinalis - Blüte quer, gefärbt mit Wacker 3A
Beitrag von: Muschelbluemchen in April 18, 2011, 20:04:19 NACHMITTAGS
Hallo Gerhard

Zitatdie Qualitaet des Fotos wirkt auf mich ungleichmaessig
Zur Beleuchtung des Biolam verwende ich eine köhlerfähige Mikroskopierlampe von Olympus - leider ist das Netzteil nicht so stabil und eventuell ändert sich da die
Helligkeit der Lampe - mit fatalen Folgen für das Stitchen, wenn ein Teil der Fotos eine andere Helligkeit besitzt.
Dir als Profis ist dieser Mangel natürlich nicht entgangen!

mit herzlichen Mikrogrüßen
Leo