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Phomi III

Begonnen von pippeti, Oktober 12, 2013, 13:09:11 NACHMITTAGS

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pippeti

Hallo noch einmal Mikro Freunde,

nach wie vor bin ich auf der Such nach einem Phomi III mit Fluoreszenzeinrichtung für mein Labor (ich hatte Jahre Lang damit gearbeitet, meine Promotion damit angefertigt und mir sehr Lieb geworden). Nun hat ein Fachman mir alle Träume genommen >:(. Der Grund: Die notwendigen Filter für DAPI, FITC bzw. PI sind aus organischem Material gebaut und sind wegen vergehen der Zeit nicht mehr zu gebrauchen. Es sei den ich diese neu herstellen lassen die natürlich eine sehr kostspielige Angelegenheit sein werde. Ist das alles Korrekt?

Stattdessen soll ich mir lieber zB. ein DIALUX 20 von Leitz (3980 Euro für Stativ plus Planobjektive: 10PH.20PH, 40PH, 100 Oel) mit Auflicht-Fluoreszenzeinrichtung mit 4 Lambda Ploemopak HBO 50 (1750 Euro) oder HBO100 (3925 Euro), Filterblöcke TypA (DAPI 320 Euro), (FITC 725 Euro) kaufen ???.

Würde ich mich über eure Meinung sehr freuen.

Grüß

       

reblaus

Hallo pipetti -

es geht doch nix über "fachmännischen" Rat! Es stimmt zwar, dass man in der Steinzeit der Auflichtfluoreszenz beim Phomi/Universal einen Sperrfilterschieber verwendet hat, der Gelatine-Sperrfilter (UV bis gelb zu rot) eingebaut hatte.

Ich weiß nun nicht, womit du während deiner Promotion gearbeitet hast (ein Hinweis wäre nützlich) - aber für  Auflichtfluoreszenz mit diesen Geräten verwendete man üblicherweise den Auflichtfluoreszenzkondensor III RS, der - wenn er komplett mit 4 Filtersätzen  bestückt ist - meistens gut erhaltene Interferenz- oder Glasfilter enthält, die völlig frei von organisches Material sind. Die "üblichen" Filtersätze bestreiten sowohl DAPI, als auch FITC und PI (ist das Propidium-Jodid?).

Nicht dass die vor dem Zahn der Zeit völlig gefeit wären - aber das gilt für alle Teile an solch alten Geräten, zumal Filter meistens von Firmen stammen, die alle möglichen Mikroskopfabrikanten beliefern.

Nicht, dass Leitz schlechtere Geräte bauen würde - das DIALUX 20 ist ein gutes Gerät und manche Dinge von Leitz sind besser als bei Zeiss (und umgekehrt).

Wenn es aber um Emotionen geht und ein älteres Gerät her soll, wäre zu überlegen ob nicht ein Universal günstiger wäre. Das ist ein Phomi ohne die obsolete Fotoeinrichtung, was die Auflichteinrichtung vereinfacht. Natürlich, wenn man sich hin und wieder von der surrenden Kassette an die goldenen Promotionszeiten erinnern lassen will ...

Für ein gebrauchsfertiges Phomi/Universal mit HBO, Neofluar-Objektiven und Fluoreszenzkondensor müsstest mit weniger als 2000.- auskommen. Dazu käme noch einen Fotoanpassung, falls man nicht mit Kleinbildfilmen klassisch arbeiten will.

Ein Dialux 20 mit 5 Objektiven und Tritubus für Foto (aber ohne Fluoreszenzzusätze) wird im seriösen Gebrauchthandel gerade für etwa 2000.- angeboten.

Gruß

Rolf



pippeti

Lieber Rolf,
herzlichen Dank für deine wertvollen Informationen.
Wegen Filter Ich bin nun sehr beruhigt.

In der Tat habe ich mit einem Photomikroskop III mit Auflichtfluoreszenzkondensor III RS gearbeitet. Das Mikroskop hatte eine Art Revolver in die ich in der Dunkelheit meine u.a. Kodak Filme mit ASA 400 (immer im Kühlschrank gelagert) reingedreht habe. Nach dem ich meinen Objekte meist Chromosomen angefärbt mit PI (richtig Propidium Iodid: Rot) und DNA-Proben FITC: Gelb-Grün, scharf gestellt hatte, habe ich einen Schieber raugezogen, damit das FL-Licht statt Okular, Richtung Kamera umgeleitet wurde. Knopf unten vorne rechts getätigt, fertig. Natürlich habe ich ab und zu mal vergessen den Schieber zu tätigen, demnach nach dem Entwickeln der Filme habe mich tot geärgert. Wenn ich mich nicht irre, habe ich stets mit Glassfilter gearbeitet. Es war nicht möglich DAPI und FITC gleichzeitig zu fotographieren. Ich glaube das Mikroskop hatte eine 100 Watt Quecksilber Lampe.

Nun wo kann ich mir so ein gepflegtes, Phomi III erwerben? ist es möglich die FL-Quicksilber-Beleuchtung mit LED zu ersetzen. Man sagt damit kann man die Filter schönen.
Ich würde gerne eine Digitalkamera aufs Phomi III montieren. geht das? damit möchte ich Dapi-Bilder mit FITC-aufnahme des gleichen Objekts in einen Rechner mergen.

Grüß aus Teheran