Unregelmäßige Ausleuchtung des fluoreszenzmikroskopischen Bildes

[Bernhard Gutwenger]

Liebe Mikroskopiker,

Ich bitte um Euren Rat: Das fluoreszenzmikroskopische Bild ist bei mir
sehr unregelmäßig ausgeleuchtet (siehe Bilder).
Ich habe 2 Filterwürfel, bei beiden zeigen sich an derselben Stelle die
dunkleren Bereiche. Diese wandern beim Schwenken der Filterwürfel mit.
Gröbere Verschmutzungen habe ich nicht festgestellt, die Aperturblende hab ich
immer ganz offen, die Feldblende genau zentriert.
Habt Ihr eine Idee, was die Ursache sein kann.

Schönen Abend,
Bernhard G.

[Bob]

dunkleren Bereiche. Diese wandern beim Schwenken der Filterwürfel mit.

Hallo Bernhard,

das klingt doch nach einem Problem mit den Filtern bzw. Filterwürfeln selbst, oder?
Kannst Du die Filter in den Würfeln verdrehen?

Kannst Du Beeinflussung durch das Umgebungslicht ausschließen?

Viele Grüße,

Bob

[konsonant]

hallo ,
Also das gleiche Bild bei beiden Filterwürfeln und auch noch an die Position im Filterwürfel gebunden ? Unterschiedliche Beschichtungsdicke ? Ansonsten Farblängsfehler der Beleuchtung ? gruß konsonant

[HCLange]

Hallo Bernhard,

im Strahlengang der Auflichtbeleuchtung sollte ein Blaufilter )BG) sein. Der hat manchmal einen zentral eingebrannten dunklen Fleck - danach sieht es für mich aus.

Herzliche Grüße
Christoph

[Klaus Herrmann]

Hallo Bernhard

ist deine Lichtquelle eine HBO? dann solltest du dir mal den Brenner anschauen! Meine Vermutung: der ist hinüber und hat auf dem Kolben dunkle Ablagerungen!

[Bernhard Gutwenger]

Vielen Dank für Eure Antworten.
Die Filterwürfel sind fix montiert. Die werden eingeschoben und rasten dann
mit einem Klick ein.
Überprüfen des Umgebungslichtes ist auf jeden Fall eine Option.
Im Auflichtstrahlengang ist kein Filter.

Grüße
Bernhard G.

[Bernhard Gutwenger]

Hallo Klaus,
Meine Lichtquelle ist eine warmweiße LED.

[Klaus Herrmann]

Hallo Bernhard,

dann ist die LED nicht richtig zentriert und nicht im Fokus (in der Halterung raus oder rein schieben)

[peter-h]

Hallo Bernhard,

ich muß etwas überlesen haben. Um welche Auflichteinheit handelt es sich? Zeiss, Nikon, Olympus, Leitz, Eigenbau? Und warum eine "warmlicht" LED, wo ich doch genau wenig ROT, aber zur Anregung viel BLAU benötige?  Ich stehe auf dem Schlauch 

Gruß
Peter

[Bernhard Gutwenger]

Hallo Klaus,

Das wird es sein, vielen Dank für den Hinweis.
Die LED hab ich nämlich selber in ein Leica-Lampenhaus eingebaut.
Morgen werde ich mich mal damit beschäftigen.

[Bernhard Gutwenger]

Hallo Peter,

Die Auflichteinheit ist eine Leica LRF 4/22, die ich vor Kurzem gebraucht erworben habe.
Eine warmweiße LED deshalb, weil ich noch keine andere zur Verfügung habe.
Ich bin noch in den Anfängen, was die Beschäftigung mit Fluoreszenzmikroskopie betrifft.

[Bernhard Gutwenger]

Hallo Mikroskopiker,

Ich hab jetzt die Ursache der unregelmäßigen Ausleuchtung gefunden.
Die Zentrierung der LED war es dann doch nicht.
Ursache war eine Kunststoff-Glasscheibe mit mattiertem Zentrum im
Leica Lampenhaus ganz vorne. Nachdem ich diese Scheibe entfernt hatte,
war der dunkle Fleck verschwunden.
Weiß jemand, wofür diese Scheibe im Hellfeld gut ist ?
Bewirkt sie da eine gleichmäßigere Ausleuchtung. Soviel ich weiß,
ist das Wärmeschutzglas weiter hinten im Lampenhaus.

Grüße,
Bernhard G.

[konsonant]

Hallo
Eine  Spekulation : Mich stört die "Übermacht des 0. Maximums" im Beleuchtungsgang, es ist dann alles so kontrastlos. Am liebsten hätte ich dort eine Punktblende, Kreisblende, Phasenblende, nur sieht man diese im Bild. Vielleicht ist dies eine solche Maßnahme der Firma Leitz.
gruß konsonant