Moos - FITC Autofluoreszenz

[Marcus_S]

Hallo Daniel,

bin ich Dir auf den Schlips getreten?

Das mit den LEDs ist eine steile These.

Das ist keine These, sondern mein Kenntnisstand. Hab ich deutlich dazugeschrieben.

Es gibt mittlerweile sehr gute Systeme der Hersteller mit blauer Anregung, die verhältnismäßig nur ,,einen Apfel und ein Ei" kosten.

Hier ging es aber eben nicht um Blauanregung, sondern um Blaugrün- bis Grünanregung zwecks Weiternutzung des bei Zidnei vorhandenen Filterblocks. Gerade neulich hab ich wieder mal geguckt und da war das Angebot solcher LEDs nicht so dolle, da hatten alle beguckten Weißlicht-LEDs von Nichia und Cree ein tiefes Tal im Emissionsspektrum, leider. Aber wenn Du da eine gute, helle LED ohne "Türkis-Loch" kennst - nur immer her mit der Info, gerne!

Ich verwende hier von Motic eine Lösung (Herr Linkenheld beratet dazu sicher gerne) die kostet neu um die 1000€ mit Würfel, led und Netzteil. Ist dimmbar und Wahrscheinlich sehr langlebig

Ganz sicher ist das eine wundervolle Lösung. Nur dürfte die nicht an ein BX61 passen.


Viele friedliche Grüße von Marcus

[SamuelReicher]

Hallo liebe Mit-Mikroskospierenden,

Ich wollte mal ein Bild teilen, das ich mit meinem (für mich) neuen Fluoreszenz-Mikroskop BX61 mit BX-RFLA und meiner (für mich) nicht neuen C-Mount Mikroskopkamera aus Fernost gemacht habe. Angeregt wurde mit FITC. Das Moos ist unbehandelt und ich habe nur Wasser unter das Deckglas.

Handelt sich um einen Stack aus  42 Fotos mit ZereneStacker (PMAX Methode), UPlanApo 10x. Musste die Qualität natürlich schon runterschrauben damit ich es hochladen konnte.

Das abgebildete Moos habe ich leider vorher nicht bestimmt.

Ich freue mich über Feedback.

Sehr coole Aufnahme    schaut grandios aus

[jcs]

Hier ging es aber eben nicht um Blauanregung, sondern um Blaugrün- bis Grünanregung zwecks Weiternutzung des bei Zidnei vorhandenen Filterblocks. Gerade neulich hab ich wieder mal geguckt und da war das Angebot solcher LEDs nicht so dolle, da hatten alle beguckten Weißlicht-LEDs von Nichia und Cree ein tiefes Tal im Emissionsspektrum, leider. Aber wenn Du da eine gute, helle LED ohne "Türkis-Loch" kennst - nur immer her mit der Info, gerne!

Hallo Marcus,

mit einer Weißlicht-LED über einen schmalbandigen, für Laserbeleuchtung ausgelegten Fluoreszenz-Filter Bilder machen zu wollen, macht keinen Sinn. Wenn LED, dann eine monochromatische im geeigneten Bereich des Spektrums, und da gibt es dann durchaus passende zwischen 470 und 530nm, siehe z.B. https://www.thorlabs.com/mounted-leds?tabName=Overview (Preise ignorieren, die LEDs selbst gibt es günstig).

Ob das erste (ästhetisch sehr gelungene) Bild des Mooses von zidnei wirklich Fluoreszenz zeigt, ist aus meiner Sicht eher fraglich, aus folgenden Gründen:
(1) Bei einem Stack aus 42 Einzelaufnahmen würde man sehr deutliches Bleaching zwischen erster und letzter Aufnahme erwarten, das ist aber nicht erkennbar.
(2) Der Farbeindruck ist bläulich-weiß, nicht grün.Das deutet darauf hin, dass doch die Anregungswellenlänge auf der Kamera gelandet ist.
(3) Im Gegensatz zur Aufnahme des Nadel-Querschnittes leuchten beim Moos alle Strukturen mit fast identischer Intensität. Das ist eher untypisch für Fluoreszenz.

LG
Jürgen

[Marcus_S]

Hallo Jürgen,

mit einer Weißlicht-LED über einen schmalbandigen, für Laserbeleuchtung ausgelegten Fluoreszenz-Filter Bilder machen zu wollen, macht keinen Sinn.

Das ist sicher eine Sichtweise, ich habe für meine Mikroskopie-Praxis eine andere.

Ich (ich!) sehe eine LED-Beleuchtung in Auflicht als Ersatz für eine Halogenlampe. Das heißt für mich, daß ich ohne Lampenwechsel sowohl Weißlicht für AL-HF, als auch "Roh-Licht" für die Versorgung der Fluoreszenz-Reflektorwürfel haben will. Ich will das. Eine Lampe einschalten, das Beleuchtungslicht am Reflektorrevolver umschalten.

Und wenn der Durchlaßbereich des Anregungsfilters nicht zu eng ist (wie breit der bei Zidneis 488er-Filtersatz ist - keine Ahnung), dann geht schon mit 100 W Halogen in Fluoreszenz sehr, sehr viel. Mein Grünfiltersatz regt bei 530 - 550 nm an, so wahnsinnig breitbandig also auch nicht, der ist mit guten Objektiven von der Helligkeit fast immer völlig ausreichend. Mit Halogenlampe. Allerdigs nicht im Mittagssonnenschein.

Und ordentliche Filter schaffen das problemlos, das gewünschte Licht herauszufiltern und das nicht benötigte Halogenlicht zu blocken, die haben bei einer HBO einen viel schwierigeren Job zu erfüllen.


Aber Deinen Link gucke ich mir mal in Ruhe an, vielleicht gibt der Inspiration. Danke dafür!


Viele Grüße von Marcus

[Daniel Scheibenstock]

Hallo Daniel,

bin ich Dir auf den Schlips getreten?

Viele friedliche Grüße von Marcus

Hallo Marcus,

Das war auf keinen Fall so gemeint, dass ich deine Meinung oder deinen Kenntnisstand angreifen wollte.

Ich glaube vielmehr, dass es hier zu einem großen Missverständnis gekommen ist 🫣.
Bei LED-Anregung wählt man gezielt eine LED mit der passenden Anregungswellenlänge. Mitglieder dieses Forums gehen sogar so weit, die Werksangaben zu überprüfen und die LEDs zusätzlich zu selektieren. Anschließend bekommt jeder Filterwürfel seine eigene, exakt passende LED.

Das entspricht dem aktuellen Stand der Technik. Kommerzielle Systeme sind – abhängig vom Budget – mit einer oder mehreren monochromatischen LEDs ausgestattet. In diesem Zusammenhang würde ich gern den Vergleich zwischen der Motic-/Primostar-Lösung und der Zeiss Colibri ziehen.

Eine LED die das kann gibt es tatsächlich leider noch nicht😒

Liebe Grüße Daniel

[Marcus_S]

Hallo Marcus,

Das war auf keinen Fall so gemeint, dass ich deine Meinung oder deinen Kenntnisstand angreifen wollte.

Ich glaube vielmehr, dass es hier zu einem großen Missverständnis gekommen ist 🫣.
Bei LED-Anregung wählt man gezielt eine LED mit der passenden Anregungswellenlänge. Mitglieder dieses Forums gehen sogar so weit, die Werksangaben zu überprüfen und die LEDs zusätzlich zu selektieren. Anschließend bekommt jeder Filterwürfel seine eigene, exakt passende LED.

Das entspricht dem aktuellen Stand der Technik. Kommerzielle Systeme sind – abhängig vom Budget – mit einer oder mehreren monochromatischen LEDs ausgestattet. In diesem Zusammenhang würde ich gern den Vergleich zwischen der Motic-/Primostar-Lösung und der Zeiss Colibri ziehen.

Eine LED die das kann gibt es tatsächlich leider noch nicht😒

Liebe Grüße Daniel

Hallo Daniel,

so verstehe auch ich, wie Du das mit den LEDs meinst. Da sind wir wohl wirklich von verschiedenen Seiten an die Sache rangegangen.

Viele Grüße von Marcus