Histologie des Herzens einer Regenbogenforelle (Oncorhynchus mykiss)

[rlu]

Hallo,

habe mich noch mal mit einem Kollegen unterhalten.
Und der lässt das Zwischenmedium auch nicht verdampfen.
Gibt aber zu Begin einen kleinen Anteil Paraffin dazu, 1/10 davon zum Butanol.
Am nächsten Tag wird das weggeschüttet/zur Seite geschüttet und mit frischen flüssigen Paraffin aufgefüllt.
Am darauffolgenden Tag wird das wiederholt, dann sollte der Geruch weg sein.

Die Gläser werden nicht vollständig geschlossen gehalten, sondern abgebdeckt.
Daher vielleicht meine Annahme, das Intermedium muss verdampfen.

Liebe Grüße
Rudolf

[rlu]

Hallo Jürgen,

Rudolf, meine einfachen Insektenparaffinpräparate habe ich entweder in Davidson ( ein AFE Gemisch ), oder in Formol fixiert. Geschlossenes Schnapsdeckelglas verwenden. Auswaschen, Überführen entsprechend Stiles in Butanol, Überführen in Stufen mit steigernder Konzentration in Paraffin.

kannst du noch auf ein paar Punkte genauer eingehen?
1. Was ist "Stiles in Butanol"?
2. Wie wäscht du aus? Nur einlegen in 70% Alkohol oder in Aqua dest. in Abhängigkeit vom Fixiermittel?
2b. Wie lange dauern deine Entwässerungsstufen? Ich glaube meine sind zu kurz.
3. Wie viele Stufen machst du und wie lange dauern die, ich meine die Wechsel vom Paraffin?
4. Verwendest du Paraffin oder Paraplast(also etwas mit Kunststoff)

Liebe Grüße
Rudolf

[Jürgen H.]

Rudolf,

Stiles hat ein Rezept speziell für die Insektenhistologie veröffentlicht. Das Prinzip ist einfach: Zur Entwässerung wird Ethanol oder Isopropanol benutzt, gleichzeitig wird das Präparat in Butanol überführt. Während der Entwässerungsschritte wird die Ethanolkonzentration erhöht, gleichzeitig auch die Menge des zugesetzten Butanols. Der Sinn liegt darin, Zerreissungen durch das plötzliche Überführen in reines Butanol ebenso wie Schrumpfungen und übermäßiges Härten zu vermeiden. Das genaue Rezept habe ich im Moment nicht zur Hand.

Das Mittel zum Auswaschen hängt vom Fixiermittel ab: alkoholische Fixiermittel entsprechend der beim Fixans verwendeten Alkoholstufe, Formalin im verwendeten Puffer.

Die Zeiten der Entwässerungsstufen müssen entsprechend der Präparatgröße und Präparatart variiert werden.

Selbst die Wechsel vom Paraffin ins Wasser musst Du schon vorsichtig ausführen, auch wenn sich die Strukturen durch die vorhergehenden Schritte schon verfestigt haben. Gieß mal etwas Ethanol in Wasser oder umgekehrt, das wirbelt ganz ordentlich. Entsprechende Risse siehst Du in Deinem Präparat, wenn Du es nicht vorsichtig machst.

Leica Formula R

Viele Grüße

Jürgen