Nadelförmige Scheinblätter der Schirmtanne

[Frank Fox]

Hallo an alle,

nach längerer Zeit des Tümpelns habe ich mich jetzt mal wieder mit dem
Schneiden eines Sprosses beschäftigt.
Ein Paraffinblock, den ich vor längerer Zeit angefertigt hatte, musste herhalten.
Ähnliche Fotos der Nadelförmige Scheinblätter der Schirmtanne hatte ich schon mal gezeigt.

Die Schnitte sind ca. 12 µm dick,
das Ganze mit Wackerfarben gefärbt und in Euparal eingeschlossen.

Die ersten drei Fotos zeigen den Schnitt noch im Paraffin eingebettet.

Viel Vergnügen beim Anschauen.




















Herzliche Grüße Frank Fox  

[Fahrenheit]

Lieber Frank,

da hast Du aber in der Schirmtannenscheinblattkinderstube gewildert. 

Das sieht zumindest aus wie ganz junge Nadeln, ggf. noch in einer Knospe.

Schöne präpariert und fotografiert!

Herzliche Grüße
Jörg

[Jürgen H.]

Lieber Frank,

erzähle uns einmal bitte etwas über Deine Paraffintechnik!

Mikrogrüße

Jürgen

[Frank Fox]

Danke lieber Jörg.
Ich habe Deinen Rat mit dem direkten Überführen des Schnittes nach dem Färben in ISO befolgt.
Auch komme ich jetzt ohne das Aufkleben der Schnitte auf den OT klar.

Hallo lieber Jürgen,

ich arbeite mit einem Rotationsmikrotom.
Was genau möchtest Du wissen?

Herzliche Grüße
Frank

[Jürgen H.]

Lieber Frank:

Die Einbettungsschritte: Fixieren/Entwässern/Intermedium/Paraffin nebst Zeiten.

Mikrogrüße

Jürgen

[Frank Fox]

Lieber Jürgen,

- fixiert in AFE (die Objekte liegen bei mir wochenlang dort  )
- das AFE auswaschen
- in ISO überführen
- langsam bei Temperatur von ca. 60 Grad in Paraffin überführen (über Nacht )
- das Objekt jetzt in reines Paraffin einbetten (ich habe das Glück, dass ich eine kleine Paraffinanlage besitze, mit Kühlung  )
- der Block wird geschnitten (Rotationsmikrotom), ich schneide mit Leitz-Klingen
- die Schnitte im Wasserbad (40 Grad) strecken
- auf OT aufziehen
- den Schnitt trocknen (über Nacht auf Wärmeplatte)
- mit Roti -Histol (oder Xylol) das Paraffin lösen (5 Minuten), in zwei verschiedenen Bädern
- in ISO (ca. 3 Minuten) auch zweimal
- über Alkoholkette (jeweils 3 Minuten) in Wasser überführen
- nach dem Wasser wird gefärbt
- z.B. Wackerfarben (jeweils ca. 3 Minuten)
- dazwischen immer wieder Wässern
- dann in ISO (ca.3 Minuten) zweimal
- dann in Euparal einschließen.

Das ist alles  .

Herzliche Grüße
Frank

[Klaus Herrmann]

Hallo Frank,

da hast du die doppelte Tapfere Schneiderlein-Methode gewählt: 14 auf einen Streich! 

Die Nadeln sind wohl noch sehr jung , ich kann keine Stomata in der Falte sehen. Und du hast sehr dünn geschnitten?

Kannst Du auch noch Detailaufnahmen zeigen?

[Frank Fox]

Hallo lieber Klaus,

auf meiner Seite http://www.mikro-foto.de/index.php/nadelfoermige-scheinblaetter-der-schirmtanne.html
sind weitere Detailaufnahmen.

Wie geschrieben, sehr dünn - 12um.

Herzliche Grüße
Frank