Silanisierung von Glas fuer Objektraeger-Kammern?

[JB]

Hallo Forum,

Ich moechte fuer dicke Praeparate eine Kammer auf einem Objekttraeger nutzen. Diese funktionert im Prinzip wie ein "haengerender Tropfen", allerdings soll zur Verbesserung der mikroskopischen Abbildung der Tropfen mit den Objekten das Deckglas UND den Objekttraeger beruehren (keine Wasser-Luft-Grenzfaeche).

Hier ist das mal schematisch zu sehen: http://www.springerimages.com/Images/LifeSciences/1-10.1007_978-3-642-20792-1_17-2

Desweiteren muessen die Objekte nach dem Mikroskopieren wieder mit einer Pipette aufgesammelt werden koennen. Um das Auslaufen der Kammer zu verhindern wird im Link oben die Umgebung mit Mineraloel abgedichtet. Das ist bei mir aber definitiv nicht moeglich.

Als Alternative habe ich mir ueberlegt, ob ich nicht einfach den Objekttraeger silanisiere (mit Dichlorodimethylsilan-Loesung in Heptan). Damit wuerde die Glasoberflaeche hydrophobisiert und der Tropfen mit den Objekten liesse sich unter Kontrolle halten.

Gibt es dazu Erfahrungen, Gedanken oder Hinweise im Forum (zur Idee; nicht zur Sicherheit der verwendeten Chemikalien)? Die optischen Eigenschaften des Objekttraegers sollten durch die Silanisierung eigentlich nicht veraendert werden.

Beste Gruesse,

Jon

Suche:
Leitz PL Fluotar 25/0.60 *160/0.17 http://www.mikroskopie-forum.de/index.php?topic=15177.0
Leitz Wasserimmersionsobjektiv 25, 50/1.00W oder 100/1.20W http://www.mikroskopie-forum.de/index.php?topic=15352.0

[olaf.med]

Lieber Jon,

hier siehst Du ein Bild unserer Immersionszelle für Spindeltische.



Unten Glas, oben Glas, links, prktisch als Abstandshalter Markor, eine gut bearbeitbare Keramik. Die lichte Öffnung der Zelle ist 2 mm und darin hält nicht nur ein Wassertropfen ganz ohne Probleme und ohne Hydrophobisierung, sondern sogar Immersionsöle, die z.T. eine viel geringere Oberflächenspannung haben.

Vielleicht geht's so...

herzliche Grüße,

Olaf

[MS19]

Schon mal an IBIDI-Slides gedacht? Dort gibt es auch geschlossene Kammern mit Kanälen, die eine Mikroskopie im aufrechten oder mit invertiertem Mikroskop erlauben.
z.B. so etwas:
http://ibidi.com/xtproducts/en/ibidi-Labware/Channel-Slides/m-Slide-VI-flat

Wenn die zu mikroskopierenden Dinge nicht allzu stark anhaftend und die Sterilitätsanforderungen nicht sehr hoch sind, kann man diese Slides auch spülen und mehrfach verwenden.

Ansonsten: Glas kann man sehr effektiv hydrophobisieren, indem man eine fertige Silikon-Isopropanol-Mischung kauft (s. Link unten), das Glas darin eintaucht und dann bei ca. 50-70°C trocknet. Das ist kinderleicht.
http://www.serva.de/enDE/ProductDetails/898_35130_Silicone_solution_SERVA_for_siliconizing_glass_and_metal_in_isopropanol.html

[MS19]

Hall Jon!

Ich sollte vielleicht noch hinzufügen, dass eine Silikonisierung (Poly(organo)siloxan-Beschichtung) von Gläsern gerne genutzt wurde, um vor Zeiten der Einmal-Gefäße aus Polypropylen widerspenstige Flüssigkeiten wie z.B. Blut oder Suspensionen von Blutplättchen dazu zu überzeugen, keine Anhaftung am Glas auszuprägen. Das Ganze war/ist - wenn es einmal auf der Oberfläche getrocknet wurde - nicht zytotoxisch und auch für den Anwender unkritisch. Eine gute Belüftung beim Eintrocknen der Silikonlösung wäre dennoch anzuraten.

Erfahrungen zur Anwendung des reaktiven Dichlordiemthylsilans habe ich leider nicht. Eine toxikologische Bewertung der BG Chemie ist verfügbar: http://www.bgrci.de/fileadmin/BGRCI/Downloads/DL_Praevention/Fachwissen/Gefahrstoffe/TOXIKOLOGISCHE_BEWERTUNGEN/Bewertungen/ToxBew269-K.pdf

Viele Grüße
Michael

[JB]

Hallo Michael,

Verzeihung fuer die spaete Antwort, ich musste meine Silanisierung erst einmal in der Praxis ausprobieren.

Danke fuer die verschiedenen Hinweise. Poly(organo)siloxan-Beschichtungen sind sicher gut, zumal man die auch im Einzelhandel bekommt (Rain-X usw. fuer Windschutzscheiben).

Letztlich habe ich mich fuer Silanisierung mit HMDS entschieden http://proscitech.com.au/cataloguex/get_notes.asp?hydrophobic . Zwar ist das Zeug ziemlich gefaehrlich, es ist aber einfach anzuwenden, monofunktional und erzeugt keinen Abfall (keine verbrauchte Hexanloesung). Jetzt teste ich aus wie lange man diese Objektraeger wiederverwenden kann.

Beste Gruesse,

Jon