Botanik: Casuarina equisetifolia *

Anatol · Dezember 01, 2013, 16:30:40 NACHMITTAGS

Hallo!

Das ist Casuarina equisetifolia.

Mikroskope Jenamed 2, MF Anpassung Apo 1,6x, Canon 650D

Nach dem freistehenden Schnitt auf dem Handzylindermikrotom (mit Leica Einmalklingen im SHK-Halter)
Querschnitt 15-35 µm, Durchmesser 0,6 -1 mm

Hier das Färbeprotokoll:

Foto 1, 4.

- Blätter in AFE für 5 Tage
- Schnitt auf dem Handzylindermikrotom
- 3 min Ethanol 70%
- 3 min Ethanol 50%
- 5 min Ethanol 30%
- Aqua dest.
- Färbung: Acridinrot+Toluidin Blau+Acriflavin+Astrablau - 2:6:2:8, t= +60 C (5 Sek), dann t= +45 C (15 Min).
- 2x auswaschen mit Aqua dest.
- Chrysoidin 1% - 5 Min.
- 2x auswaschen mit Aqua dest.
- differenzieren 70% Ethanol mit HCl (100:2) 10-15 Sekunden
- 3 x auswaschen mit Aqua dest..
- Entwässern mit 3x gewechseltem Isopropylalkohol 99,7 %
- Einschluss in Euparal

Foto 2.
- Blätter in AFE für 5 Tage
- Schnitt auf dem Handzylindermikrotom
- 3 min Ethanol 70%
- 3 min Ethanol 50%
- 5 min Ethanol 30%
- Aqua dest.
- Färbung: Acridinrot+Acriflavin+Alciangruen - 2:2:8, t= +60 C (5 Sek), dann t= +45 C (15 Min).
- 2x auswaschen mit Aqua dest.
- Chrysoidin 1% - 5 Min.
- 2x auswaschen mit Aqua dest.
- differenzieren 70% Ethanol mit HCl (100:2) 15-30 Sekunden
- 3 x auswaschen mit Aqua dest..
- Entwässern mit 3x gewechseltem Isopropylalkohol 99,7 %
- Einschluss in Euparal

Foto 3, 5
- Blätter in AFE für 5 Tage
- Schnitt auf dem Handzylindermikrotom
- 3 min Ethanol 70%
- 3 min Ethanol 50%
- 5 min Ethanol 30%
- Aqua dest.
- Färbung: W-3A- Färbung -Acridinrot+Acriflavin+Astrablau- 2:2:8, t= +60 C (5 Sek), dann t= +45 C (15-30 Min).
- differenzieren 70% Ethanol mit HCl (100:2) 15-30 Sekunden
- 3 x auswaschen mit Aqua dest.
- Entwässern mit 3x gewechseltem Isopropylalkohol 99,7 %
- Einschluss in Euparal

Foto 6,7,8,9,
- frisch Schnittfixierung in AFE für ca. 10-15 Minuten
- 3 min Ethanol 70%
- 3 min Ethanol 50%
- 5 min Ethanol 30%
- Aqua dest.
- Färbung: W-3A- Färbung (Acridinrot+Acriflavin+Astrablau- 2:3:12), t= +60 C (5 sek), dann t= +45 C (15-30 Min).
- differenzieren 70% Ethanol mit HCl (100:2) 10-12 Sekunden
- 3 x auswaschen mit Aqua dest.
- Entwässern mit 3x gewechseltem Isopropylalkohol 99,7 %
- Einschluss in Euparal

Foto 1

Hellfeld, GF-Planachromat 12,5 x, Mikroaufnahmen sind mit Helicon Focus gestackt

Foto 2

Hellfeld, GF-Planachromat 12,5 x, Mikroaufnahmen sind mit Helicon Focus gestackt

Foto 3

Dunkelfeld, GF-Planachromat 12,5 x, Mikroaufnahmen sind mit Helicon Focus gestackt

Foto 4

Hellfeld, GF-Planachromat 12,5 x, Mikroaufnahmen sind mit Helicon Focus gestackt

Foto 5

Hellfeld, GF-Planachromat 12,5 x, Mikroaufnahmen sind mit Helicon Focus gestackt

Foto 6

Dunkelfeld, Planachromat 20 x, Panorama-Stitching mit Photoshop CS3

Foto 7

Dunkelfeld, Planachromat 10 x, Mikroaufnahmen sind mit Helicon Focus gestackt

Foto 8

POL, lambda, Planachromat 10 x

Foto 9

Hellfeld, Planachromat 20 x, Panorama-Stitching mit Photoshop CS3

Detlef Kramer · Dezember 01, 2013, 17:12:48 NACHMITTAGS

Hallo Anatoli,

hast Du wunderbar hinbekommen, Glückwunsch!

Herzliche Grüße
Detlef

Klaus Herrmann · Dezember 01, 2013, 17:17:58 NACHMITTAGS

Hallo Anatol,

excellent and beautyful! The Casuaria is not easy to cut, so your cuts are very good!
Is the color Etzold and Wacker W3A?

Rolf-Dieter Müller · Dezember 01, 2013, 17:34:59 NACHMITTAGS

Hallo Anatoly,

wirklich meisterhaft, denn Deine Färbung ist so wunderbar und klar differenziert aufgezogen.

Natürlich hat Klaus schon die erste naheliegende Frage gestellt, welche Färbung das denn ist? Und ich möchte sie noch mit meiner Frage ergänzen:

Ist das ein Wasserpräparat bzw. welches Einschlussmittel hast Du genommen?

Viele Grüße
Rolf-Dieter

Michael W. · Dezember 01, 2013, 18:33:58 NACHMITTAGS

Hallo Anatoly,

deine Schnitte sind ein Traum. Sowohl die Schnitte selbst als auch die Färbung sind dir perfekt gelungen.

Casuarina equisetifolia muss ich auch noch irgendwann schneiden.

Den Fragen von Klaus und Rolf-Dieter schließe ich mich an. Zusätzlich würde mich noch interessieren, wie du geschnitten hast (Paraffin oder "Trocken"?).

Viele Grüße
Michael

koestlfr · Dezember 01, 2013, 18:44:32 NACHMITTAGS

Hallo Anatoly!

WUNDERSCHÖN!

Liebe Grüße
Franz

Rawfoto · Dezember 01, 2013, 21:53:10 NACHMITTAGS

Guten Abend Anatoly

Super!!!

Liebe Gruesse aus Wien

Gerhard

Fahrenheit · Dezember 01, 2013, 21:53:40 NACHMITTAGS

Lieber Anatoly,

das sind sehr schöne Schnitte und sie sind pefekt gefärbt!

Herzliche Grüße
Jörg

Anatol · Dezember 02, 2013, 05:02:45 VORMITTAG

Hallo!

Vielen Dank Detlef, Klaus, Rolf-Dieter, Michael, Franz, Gerhard, Jörg !

Zitat von: Klaus Herrmann in Dezember 01, 2013, 17:17:58 NACHMITTAGS
excellent and beautyful! The Casuaria is not easy to cut, so your cuts are very good!
Is the color Etzold and Wacker W3A?

Zitat von: Rolf-Dieter Müller in Dezember 01, 2013, 17:34:59 NACHMITTAGS
welche Färbung das denn ist? Und ich möchte sie noch mit meiner Frage ergänzen:
Ist das ein Wasserpräparat bzw. welches Einschlussmittel hast Du genommen?

Zitat von: Michael W. in Dezember 01, 2013, 18:33:58 NACHMITTAGS
Den Fragen von Klaus und Rolf-Dieter schließe ich mich an. Zusätzlich würde mich noch interessieren, wie du geschnitten hast (Paraffin oder "Trocken"?).

Ich Änderungen vorgenommen (lesen oben)

wolfg · Dezember 02, 2013, 17:00:30 NACHMITTAGS

Das sind wunderbare, sehr ästhetische Bilder, die mich passend zur Jahreszeit
ein wenig an Schneeflocken erinnern.

Viele Grüße
Wolfgang

Eckhard · Dezember 02, 2013, 19:22:37 NACHMITTAGS

Hallo Anatoly,

wirklich schöne Färbungen. Endlich mal etwas anderes als W3A und Etzold!

Herzliche Grüsse
Eckhard

Rolf-Dieter Müller · Dezember 02, 2013, 21:37:41 NACHMITTAGS

Hallo Anatoly,

vielen Dank für Deine Ergänzungen, denn jetzt kann ich auch sehen warum mir Bild 1 und Bild so gut gefällt.

Offensichtlich ist es das Toluidinblau, was noch zur Differenzierung im Blau beiträgt. Ein sehr interessanter Ansatz.

Viele Grüße
Rolf-Dieter

hajowemo · Dezember 03, 2013, 07:55:42 VORMITTAG

Lieber Anatoly,
deinen Beitrag finde ich sehr interessant.
Die Anwendungen der verschiedenen Farbmischungen sind schon beeindruckend.
Herzlichen Dank für diese Anregung.
Liebe Grüße
Jochen

Fahrenheit · Dezember 03, 2013, 20:30:46 NACHMITTAGS

Lieber Anatoly,

vielen Dank für die detaillierten Angaben zu den Färbungen! Da werde ich einiges einmal ausprobieren.

Herzliche Grüße
Jörg

peter-h · Dezember 04, 2013, 18:23:21 NACHMITTAGS

Hallo Anatol,

eine ganz ausgezeichnete Dokumentation !
Casuarina ist auch ein Lieblingsmotiv von mir, allerdings bin ich auf fertige Schnitte ausgewichen. Robin Wacker hat 8µm Schnitte angefertigt. Anbei 2 Aufnahmen Casuarina equisetifolia Wacker-Färbung im Format 2500 x 2500 Pixel. Im Original 5k x 5k Pixel als Mosaik zusammengesetzt.
http://www.mikroskopie-ph.de/Casuarina-equisetifolia-1b.jpg
http://www.mikroskopie-ph.de/Casuarina-equisetifolia-2a.jpg

Viele Grüße
Peter