Hallo zusammen ,
In naher Zukunft möchte ich mich mit der Fluoreszenzmikroskopie beschäftigen. Die Frage die sich mir dabei stellt ist, welche Beleuchtung soll ich einsetzten ? Lieber eine HBO Beleuchtung oder lieber einen LED Umbau ? Das Manko ist ja, dass ich mit der oft beschrieben Royal blue LED ja nur Blauanregung nutzen kann. Mit der HBO hingegen alle Wellenlängen Bereiche. Die HBO sind aber wiederum ziemlich teuer und auch nicht ungefährlich.
Welche Breiche würden sich mit Blauanregung abdecken lassen bzw. was kann ich mit der Blauanregung alles fluoreszieren ??
Ich habe da leider nicht viel Ahnung von, aber ich weiß, dass hier einige sehr viel daüber Wissen !
Es würde mich freuen wenn ihr mir helfen könntet :)
Fluoreszierende Grüße
David
Hallo David,
das kenne ich, da gibt es etwas, das für irgendetwas gut ist und das muß man dann auch unbedingt haben. ;D
Du willst also irgendwas zum Fluoreszieren bringen, weißt aber noch nicht genau was. Zum Einstieg kann ich dir das Chlorphyll im Tümpelmaterial empfehlen, das bei normaler Beobachtung grün erscheint, in der Fluoreszenzanregung aber rot glüht.
Dazu brauchst du entsprechende Filtersätze und einen speziellen Auflicht-Kondensor für diese Anwendung. Ist denn da schon was vorhanden? Am einfachsten geht es im Durchlicht mit einem BG-12 Anregungsfilter und einem OG530 Kantenfilter.
Dazu noch dieser Link, ich hoffe, er hilft dir etwas weiter.
http://www.mikroskopie-forum.de/index.php?topic=10933.0
Viele Grüße
Bernd
Hallo Bernd,
Danke für deine Antwort.
Es sollen eigentlich fast nur Pflanzenschnitte zum Fluoreszieren gebracht werden. Gelegentlich auch mal die ein oder andere Alge aus dem Tümpel.
Die Frage ist nun ob Blauanregung für diese Zwecke ausreichend ist, also eine blau LED ?
Viele Grüße
David
Hallo David,
die Blauanregung ist eine Art der Anregung, die auch bei Pflanzenschnitten funktioniert, du hast es ja gesehen.
Die Blaue LED kostet als solche keine 10 Euro, jedoch muß sie als Lichtquelle an der richtigen Stelle untergebracht werden, damit die Anregung auch optimal funktionieren kann.
Hinzu käme noch die elektrische Anpasschschaltung, die man auf verschiedene Arten realisieren kann. Die einfachste ist das Netzteil mit geeignetem Vorwiderstand zur Strombegrenzung, damit die LED nicht zerstört wird.
Viele Grüße
Bernd
Zitat von: David 15 in August 25, 2013, 17:56:08 NACHMITTAGS
....
Es sollen eigentlich fast nur Pflanzenschnitte zum Fluoreszieren gebracht werden. Gelegentlich auch mal die ein oder andere Alge aus dem Tümpel.
Die Frage ist nun ob Blauanregung für diese Zwecke ausreichend ist, also eine blau LED ?
...
Hallo David,
das Mikroskopische Kollegium Bonn hat zu diesem Thema einen informativen Beitrag veröffentlicht, wobei hier der Versuch zur Ermittlung der Anregungswellenlängen von Chlorophyl für Dich interessant sein dürfte. http://www.mikroskopie-bonn.de/bibliothek/botanik/index.html#a928
Herzliche Grüße
Frank
Hallo David -
Am ökonomischsten dürfte eine Ausrüstung mit einer kräftigen weißen 3000 mA LED sein - die ist auch ohne Fluo sehr nützlich. Dann brauchst Du einen blauen Erregerfilter auf die Leuchtfeldblende oder den Schwenkhalter und über dem Objektiv einen gelben bzw. roten Sperrfilter. Der Blauanteil einer starken weißen LED ist zwar nicht so hoch wie der einer schwächeren aber reinrassigen blauen, doch fürs Erste völlig ausreichend!
Wegen künftiger Ausbaumöglichkeiten es wäre nützlich, wenn du hier auch gleich den aktuellen Stand deiner Ausrüstung mitteilst. Nachdem du einen Revolver dafür gesucht hast, scheinst du ja beim Phomi oder Universal angelangt zu sein. Wenn ja, solltest du genau beschreiben mit welcher Beleuchtung das derzeit ausgerüstet ist. Auflicht durch Umschalten oder direkt von hinten? Ist ggf. ein Auflichtkondensor vorhanden?
Viele Grüße
Rolf
Hallo,
Danke für eure Tipps !
@Bernd
Zitatjedoch muß sie als Lichtquelle an der richtigen Stelle untergebracht werden, damit die Anregung auch optimal funktionieren kann.
Ich glaube da weiß ich schon an wen ich mich dann wenden muss ;D
@Rolf
Ja mein neuestes Ungetüm ist ein Phomi 8) Ich habe vor an dieses einen Fluoreszenz Auflichtkondensor zu montieren und das Licht über eine seitliche Lichteinspiegelung einzuspiegeln. Als Lampengehäuse habe ich an einen ''Bunker'' gedacht. Das ist aber alles noch in Planung !
Viele Grüße
David
Hallo David,
ich habe am WL statt des Luftschutzbunkers die Leuchte 60 in Betrieb, ich fand sie handlicher. Die darin befindliche "Lkw"-Birne habe ich durch eine königsblaue LED ersetzt. Funktioniert prima - allerdings nur mit Anregungsfilter! Die Angaben der Hersteller bzgl. der emittierten Wellenlänge sind zu optimistisch, da ist immer Streulicht anderer Wellenlänge.
Hallo David,
Für Auflichtfluoreszenz kannst Du auch eine 100W Halogen- Beleuchtung nutzen, funktioniert bei mir bestens.
Gruß
Harald
Hallo David,
gegen 100 Watt in Halogen setze ich 1 Watt in LED als Royal Blue.
100 : 1.
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures004/132392_59847452.jpg) (http://s556.photobucket.com/user/mikroloewe/media/Kohlebogen-LED.jpg.html)
Viele Grüße
Bernd
...und 100W Halogen werden sehr, sehr heiß...
Hallo,
beim III RS mit 100W Halogen oder Weißlicht-LED wäre eine zusätzliche Auflicht-Hellfeldbeleuchtung möglich.
Heiß spielt keine große Rolle, und Energieverbrauch ..... gut, wenn sich in Davids Wohnung nur noch Energiesparlampen befänden, wäre das ein Thema.
Nur für Blauanregung hat sicherlich die LED die Nase vorn, für gelegentliche Beobachtungen im UV, violett, blau und grün, die HBO50, mit allen ihren Nachteilen. Für ständige Beobachtungen mit diesen Wellenlängen wäre ein 4-fach LED Wechsler angebracht.
Herzliche Grüße
Frank
Hallo David,
was das Bild von Bernd zeigt ist mein Standard 16 mit dem IV FL-Auflichtkondensor und Bernds Royalblue-LED Adaption. Perfekte Lösung!
Hab ich noch und gebe sogar ab! :D
Hallo David,
Die Nichia NCSU033B(T) ist bei UV-Auflicht das Leuchtmittel meiner Wahl. Kostet zwar etwas mehr (75.-) aber die macht satte 300mW@365nm Strahlungsleistung (oder mehr, je nach Ranking).
Schutzfilter für die Augen nicht vergessen!
Ciao,
Guy
Hallo,
Danke für eure Hilfe ( Auch per PN ) :)
Ich tendiere dann doch eher zur blauen LED und einem kleineren Lampengehäuse :)
@Klaus
Das Fluoreszenverfahren soll an einem Phomi bewerkstelligt werden. Das ist nun mein Gerät für alles 8) Aber ein zweites Gerät, eins für Hellfeld und PH und ein anderes für Fluoreszenz wäre auch nicht schlecht... ;D Pfui, nein David... Ich habe jetzt schon keinen Platz mehr :D
Jetzt heißt es erstmal die nötigen Teile beschaffen und sich dann langsam in dieses schöne Verfahren einzuarbeiten :)
Viele Grüße
David
Hallo David,
ZitatIch tendiere dann doch eher zur blauen LED und einem kleineren Lampengehäuse
Im Gegensatz zu der Backofenlösung wäre das doch ziemlich cool. ;)
Mit anderen Anregungen bei anderen Wellenlängen kannst du dich immer noch später befassen und aufstocken, sofern es dir von Interesse sein wird.
Viele Grüße
Bernd
Hallo David,
eins für Hellfeld und PH und ein anderes für Fluoreszenz wäre auch nicht schlecht...
da könnte ich Dir schon behilflich sein
Aber nicht übertreiben!
Solltest Du aber lieber Dein Standard auf Fluoreszenz erweitern statt das PHOMI,
Du weißt ja, ich habe zwei IV Fl-Kondensoren, man hat ja schließlich auch zwei Augen, Ohren, Hände Beine usw. :-)
Herzliche Grüße
Herbert
Hallo Herbert,
ZitatDu weißt ja, ich habe zwei IV Fl-Kondensoren, man hat ja schließlich auch zwei Augen, Ohren, Hände Beine usw. :-)
ist das nicht ein bischen wenig? Die Hände haben schließlich fünf Finger!
Viele Grüße
Bernd
Lieber Bernd,
ähhm, meinst du nicht mehr Mikroskope wie Finger ? Oder war das der Wilfried ? Oder ich ?? ::) 8)
Hallo Bernd,
und die Füße haben auch jeder fünf Zehen,
jetzt habe ich endlich ein Argument für meine Frau: zwanzig Mikroskope für Finger und Zehen,
plus je zwei für Augen und Ohren und die überzähligen verstecke ich einfach.
Viele Grüße
Herbert
Hallo Herbert,
Zitatjetzt habe ich endlich ein Argument für meine Frau: zwanzig Mikroskope für Finger und Zehen,
plus je zwei für Augen und Ohren und die überzähligen verstecke ich einfach.
das geht viel einfacher mit schönen Aufnahmen und du brauchst keine zu verstecken.
Viele Grüße
Bernd