Liebe Fluoreszenzler,
angesteckt durch den Link von Regi (im Cafe) bin ich mal wieder der UV-Fluoreszenz näher gekommen. Die Bilder aus dem US Forum sind so einmalig, dass ich wissen wollte was dahinter steckt. So mußte ich zunächst meine sehr eigenwillige Bastellösung für die Fluoreszenz aufrüsten und "ordenlicher" bauen.
1. die kräftige Nichia LED für 365nm
2. einen guten Anregungsfilter
3. einen richtigen Strahlenteiler
4. einen geeigneten Sperrfilter
5. dazu die Mechanik (Drehbank) für den alten Zeiss Knochen
6. geeinete Objektive aussuchen (großer Arbeitsabstand für Auflicht und UV tauglich)
7. viele kleine Arbeiten mit großem Zeitaufwand
Aber das war nur die Hardware !
Jetzt noch im Botanischen Garten nach Farnen mit Sporangien Ausschau halten (war nicht sehr erfolgreich) >:(
Letztlich entstanden diese ersten Bilder
Zunächst die Blattunterseite mit den Stomata (alle mit 365nm Anregung und etwa Zeiss Filtersatz 02)
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures004/180391_5257962.jpg)
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures004/180391_35281714.jpg)
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures004/180391_44173298.jpg)
Leider sind die Kapseln alle schon aufgeplatzt.
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures004/180391_41641358.jpg)
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures004/180391_61921792.jpg)
Mit einem ULWD MSPlan 50x Objektiv
Alle Bilder sind Stacks von 50 - 100 Bilder und wirklich kräftig nachbearbeitet. Die bunten Kugeln im US-Forum werde ich wohl nie erreichen. Aber ein altes Oly BH-2 mit kleinen Zusätzen muß und soll auch keine Konkurenz sein ;D
Viel Spass
Peter
P.S. die Ausrüstung wird vielleich einmal später vorgestellt.
Lieber Peter
ich finde die Aufnahmen fantastisch, besonders Bild 2+3!!
Gratulation zu diesem Ergebnis!
Viele Mikrogrüße
Bernhard
Lieber Peter -
na also! Dieses vorläufige Ergebnis mit "fliegendem Aufbau" der Einrichtung lässt kein Zweifel daran, dass du die USA-Ergebnisse demnächst auch erreichen wirst!
Nur eine Frage: Warum braucht man "6. ... großer Arbeitsabstand für Auflicht ..." ?
Viele Grüße
Rolf
Danke für die netten Worte !
@ Rolf,
Die Blattunterseite mit den Sporangien ist leider nicht eben und natürlich auch nicht mit einem Deckglas eigedeckt. Was also soll ich an Objektiven verwenden ?
Bereits ein Zeiss Planapo 10/0,32 hat nur 0,35mm Arbeitsabstand , die Neofluare etwas mehr, aber ab 25/0,6 sollte schon ein Deckglas vorhanden sein. Also müssen reine Auflichtobjektive her. Da der Mensch aber kaum alles besitzen kann ...... kommen die Experimente.
Von Olympus habe ich die Auflicht MSPlan , LWD MSPlan und ULWD MSPlan bis 50x.
Nun kamen Überlegungen und Versuche, wie an einem Olympus BH-2 mit einem Zeiss Auflichtkondensor IV FL (schön für 160mm) doch noch die Objektive der Unendlichreihe adaptiert werden können, ohne dass es Qualitätsverluste gibt. Kopfschütteln erlaubt ;D , aber es funktioniert prächtig. Stichwort "Telansystem" im Zeiss-Knochen abschalten. ;) Die untere Linse wird ausgeschraubt, die obere Linse ist dann die Tubuslinse. Vergrößerungsfaktor stimmt nicht ganz, da Olympus eine f=180mm Linse wünscht und es nun eine f=160mm Linse ist. Über CVD oder chromatische Korrektheit muß man bei dieser Art der Aufnahmen keine Worte verlieren. Ich war aber überrascht wie gut es geht ! Dass die Ringschwalben auch angepaßt werden müssen ist selbstverständlich.
Viele Grüße
Peter
Hallo Peter,
ich bin begeistert! Und ich würde mich über eine (makroskopische) Fotografie des Farnblatts freuen. Da hätte man dann vielleicht die Chance die gleiche Spezies zu finden und auch mal anzuschauen.
Steffen
Lieber Peter,
schön gestacked - ist natürlich Aufwand 100:1 gegenüber meinem! ;) Deshalb meinte Safari-Wolfgang auch, ich sei auf dem richtigen Wege. :D Den Ehrgeiz hatte ich allerdings nicht die USA-Kollegen auch nur entfernt zu erreichen - die haben auch ganz offensichtlich einen besonders geeigneten Farn gehabt - was in der Probe nicht drin ist kann man auch nicht rausholen. Mir gings nur darum mal zu überprüfen, ob man diese Farbenvielfalt erzielen kann mit einem normalen UV-Filterblock und dafür reicht auch ein Schuß!
ZitatStichwort "Telansystem" im Zeiss-Knochen abschalten. Zwinkernd Die untere Linse wird ausgeschraubt, die obere Linse ist dann die Tubuslinse.
Das habe ich vor Jahren schon gemacht und an einem Standard 25 ICS realisiert. Allerdings habe ich
beide Telanlinsen entfernt. Das Bild habe ich in Würzburg gemacht - vielleicht warst du bei der Demo sogar dabei?
Das Ergebnis war auf jeden Fall ganz brauchbar.
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures004/180397_35017241.jpg) (http://s106.photobucket.com/user/microklaus/media/800_IMG_0006-54.jpg.html)
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures004/180397_32271987.jpg) (http://s106.photobucket.com/user/microklaus/media/IMG_0001-14.jpg.html)
Hallo Steffen,
ZitatUnd ich würde mich über eine (makroskopische) Fotografie des Farnblatts freuen. Da hätte man dann vielleicht die Chance die gleiche Spezies zu finden und auch mal anzuschauen.
Ich behaupte mal kühn, dass jeder Farn mit Sporangien ähnliche Ergebnisse bringt. Ich hab bei uns im Garten nur einfach ein Fizzelchen schnöden Wurmfarn geholt. Also einfach selber versuchen und Ergebnisse hier zeigen - aber die Latte liegt jetzt hoch: 100 Stacks sollten es schon sein, sonst gibt es keine Lorbeeren! :D
Hallo Peter und Klaus,
also ich bin immer wieder begeistert, welche tollen Fotos hier in diesem Forum gezeigt werden! Wenn ich da noch meine Versuche dazu vergleiche :-[.
Liebe Grüße
Werner
Lieber Peter,
es freut mich daß ich dich zu dieser "Arbeit" animiert habe. Und das Ergebnis ist sehr sehenswert.
Herzliche Grüße
Regi
Lieber Peter,
ich fand eben beim kleinen Rundgang noch sehr frische Sporangien an der Mauerraute. Habe mal mit dem Stemi ein Foto versucht und dafür 16 Bilder gestapelt. Die Vergrößerung ist ca. 40x.
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures004/180432_273093.jpg) (http://s378.photobucket.com/user/regikunz/media/Farnsporangien2_zpsawdkgbmb.jpg.html)
Nur als kleiner Eindruck wie sich Sporangien ohne Fluoreszenz zeigen.
Herzliche Grüße
Regi
Guten Morgen Peter
Na' da tut sich doch schon einiges, Gratulation ...
Hast Du keine Angest Dir das Objektiv zu zerstören, wenn ich Olympus richtig verstanden habe warden für die UV-Anwendung andere Vergütungen und ein anderer Kitt/Kleber verwendet?!?
Da ich die ULWDs auch alle habe bin ich da schon auf Deine Sicht gespannt, die UV Objektive ohne Deckglas habe ich zwar alle, der Arbeitsabstand ist aber wirklich ein Problem bei derartigen Motiven ...
Liebe Grüße
Gerhard
Hallo Gerhard,
Zitatder Arbeitsabstand ist aber wirklich ein Problem bei derartigen Motiven ...
Ich habe am BX 50 die UMPlan Fl BD Objektive eingesetzt für die Fluoreszenz- und Dunkelfeld-Aufnahmen. Beim 5er ist der AA 12, beim 10er immer noch 6,5 mm das reicht üppig. Da wäre auch stapeln problemlos möglich.
Aber eine technisch-optische Frage habe ich doch noch: Ich hatte ja geschrieben, dass ich im CZ-Fluoreszenzkondensor
beide Telanlinsen entfernt habe. Peter hat nur die untere entfernt und die obere als Tubuslinse belassen. Der Grund ist mir nicht verständlich. Bei mir war das ja so: durchgängig CZ unendlich: Objektive, der "Knochen" ist leer, dann Tubuslinse und Okulare bzw Kamera. Peter braucht beim Oly-System doch keine Tubuslinse?
Lieber Klaus,
ich habe NUR den Zeiss-Knochen als Zwischenstück. Es geht dann wieder auf Olympus Trino vom BH-2, also endlich !
Objektive unendlich - durch den Knochen (unendlich) - obere Telanlinse als Tubuslinse - weiter zum Trino für endlich. Was ist daran falsch?
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures004/180457_16142635.jpg)
Sooooo grottenschlecht ist das Bild nicht !
Das MSPlan 10x hat einen AA von 10,2mm , das LWD MSPlan 20x von 7,0mm und beim ULWD MSPlan 50x sind es 8,1mm. Das reicht immer!
@Gerhard,
ob ich die Objektive wirklich schädige kann ich nicht sagen. Es ist kein Dauerbetrieb, sondern nur wenige Minuten. Zudem schädige ich die Sporangien schneller als mir lieb ist. Kann manchmal wenige Sekunden dauern und sie verändern sich KRÄFTIG ! Ich bin in Kontakt mit Rogelio Moreno und er gab mir noch Ratschläge und bestätigt die schnelle Schädigung der Sporangien durch UV. Daher auch die langen Bel.zeiten bei ihm mit wenig Energie.
Grüße
Peter
Lieber Peter,
ZitatSooooo grottenschlecht ist das Bild nicht !
Nein wirklich nicht und es ist sogar schön bunt! ;)
Nur mal aus reiner Neugier gefragt: was passiert, wenn du die obere Telanlinse auch entfernst? Im BH2-Tubus ist doch auch eine Tubuslinse drin, wenn ich da von unten rein schaue?
Hallo Peter,
kannst du kurz beschreiben wie sich die Sporangien verändern?
Gruss Arnold
Lieber Klaus,
der Trino vom Olympus BH-2 hat nur ein Glasplättchen (reiner Staubschutz), aber keine Linse ! Um das zu testen ist es einfach in den Fotostuzen blicken und damit in die Ferne sehen. Eine Linse würde ein unscharfes Bild geben. Es ist aber optisch wie ein Ofenrohr. Bunt sind die Striche, da ich das Bild verkleinert habe und so die jpg Artefakte zuschlagen.
@Arnold,
die Sporangien versuchen sich zu öffnen, bzw. dieser "Wellschlauch" um die Behälter herum streckt sich.
Die Nichia LED mit dieser hohen Energie ist wirklich nicht zu unterschätzen.
Grüße
Peter
Hallo Peter,
dieser Ring (Anulus) wird sich immer bewegen! Er reagiert auf Feuchtigkeit und Trockenheit!
Kaufe dir in einem Pflanzencenter ein Farn z.B. ein Polypodium dann hast du zu Hause einen grossen Vorrat für deine Experimente. Du kannst dann auch mit den heranwachsenden Sporangienanlagen experimentieren. Diese verhalten sich sicher viel ruhiger.
Gruss Arnold
Zitat von: peter-h in Oktober 23, 2015, 13:34:49 NACHMITTAGS
Lieber Klaus,
der Trino vom Olympus BH-2 hat nur ein Glasplättchen (reiner Staubschutz), aber keine Linse ! Um das zu testen ist es einfach in den Fotostuzen blicken und damit in die Ferne sehen. Eine Linse würde ein unscharfes Bild geben. Es ist aber optisch wie ein Ofenrohr. Bunt sind die Striche, da ich das Bild verkleinert habe und so die jpg Artefakte zuschlagen.
.....
Lieber Peter,
dann hättest du ja den Trino für die alte endlich Optik auf dem BH-2. Der neure Trino für die unendlich Objektive hat natürlich eine Tubuslinse mit f=180mm eingebaut (so wie es auf den unendlich Objektiven ja auch steht) und dann müsstest du an dem Zeiss Knochen beide Telanlinsen weglassen, so wie Klaus es bei seinem Knochen am Zeiss Standard ICS ja auch macht.
Was mich allerdings etwas wundert ist, dass die obere Zeiss Telanlinse die Olympus Tubuslinse einigermassen ersetzt. Von der Kompensation her ist das ja kein Problem, denn die wird bei der ersten Generation der Olympus Unendlichoptik ja noch im Okular gemacht. Aber wie sieht es mit dem Objektivabgleich bei kleinen Vergrösserungen aus und wie gut werden die Vergrösserungswerte der Objektive eingehalten ?
viele Grüsse
Wilfried
P.S.: Die Fluoreszenzbilder sind natürlich traumhaft !
Lieber Wilfried,
vermutlich hilft ein Bild.
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures004/180485_38442901.jpg)
Es ist also die alte 160mm Technik. Und da in dem Filtereinschub nicht zuviel Platz war, kommen externe Sperrfilter zum Einsatz. Hier meine Eigenbau-Filterbank.
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures004/180485_52208950.jpg)
Zur Vergrößerung, und auf Wunsch eines einzelnen Herren. ;D
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures004/180485_592538.jpg)
Daraus ableitbar, dass die obere Telanlinse weit ab von 180mm Brennweite liegt. Der Objektivabgleich stimmt natürlich auch nicht ganz, aber noch erträglich. Das MSPlan 5x ist wegen starker Eigenfluoreszenz nicht brauchbar und die MSPlan 2,5x und MSPlan 1,5x sind ebenfalls nicht geeignet.
Weit schöner wäre es den Olympus BH2-UMA Auflichtkondensor zu verwenden und an Stelle eines Hell- oder Dunkelfeld Würfels den Farbteiler für UV zu verwenden.
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures004/180485_26664247.jpg)
Leider findet man schneller einen 6. im Lotto oder einen Klumpen Gold, als diese Einsätze >:( und so habe ich mich für diese Umbauversion entschieden. Noch besser wäre ein neues Mikroskop, aber .........
@Gerhard,
In einer alten Schrift von Olympus sind die Objektive MS Plan und MD Plan für die Fluoreszenz geeignet. Sicher ein Kompromiss.
Ein schönes Wochenende
Peter
Hallo.
diese Bilder, die auch hier gezeigt wurden, haben mich schon sehr fasziniert. Leider habe ich kein Fluoreszenz-Mikroskop. Ich habe dennoch versucht, mit einfachsten Mitteln so etwas zu erreichen. Das bescheidene Ergebnis möchte ich Euch zeigen.
Als Probe diente ein Ästchen eines Wurmfarns aus dem Garten.
Das Bild ist mit Auflicht-Dunkelfeld entstanden. Als Beleuchtung diente eine 3W Led mit Emissionsmaximum bei 430 nm. Merkwürdiger Weise habe ich bei 365 nm und 390 nm keinerlei Leuchterscheinung gesehen. Aufnahme mit dem 25/0,50 Planachromaten und Projektiv PK 2,5. Fotographiert mit einer Kamera-Empfindlichkeit von 1600 ASA. Als Sperrfilter diente eine einfache orange Filterfolie.
Das Bild wurde aus 80 Aufnahmen mit Picolay gestackt und mit NeatImage entrauscht.
Neidische Grüße
Carsten
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures004/180498_59040471.jpg)
Hallo,
diesem Wurmfarn (D. filix-mas) ...
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures004/180503_39575513.jpg) (http://www.directupload.net)
... versuchte ich mit einer Party-Schwarzlicht-Lampe unter den Schleier zu leuchten:
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures004/180503_36067624.jpg) (http://www.directupload.net)
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures004/180503_12430367.jpg) (http://www.directupload.net)
Viele Grüße,
Heiko
Danke für den Hinweis Peter ...
Liebe Grüße
Gerhard
Liebe UV Spezialisten,
je mehr man sich mit Farnen beschäftigt, um so mehr erkennt man auch. Und statisch ist es in keinem Fall. Da krabbeln auch mal 10 Schildläuse herum :o ::)
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures004/180641_20899022.jpg)
Auflichtbeleuchtung Objektiv MSPlan 10/0,3
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures004/180641_931912.jpg)
UV-Auflichtbeleuchtung Objektiv MSPlan 10/0,3
Selbst starke UV-Strahlung schädigt sie kaum, bzw. es sieht so aus. Durch den Farbkontrast fallen sie herrlich auf.
Lausige Grüße
Peter
Zitat von: Klaus Herrmann in Oktober 22, 2015, 00:05:02 VORMITTAG
die Latte liegt jetzt hoch: 100 Stacks sollten es schon sein, sonst gibt es keine Lorbeeren! :D
Mit Stacken kenne ich mich eher noch nicht so aus, aber es hat Vorteile, wenn Hobby und Beruf nahtlos ineinander übergehen ;). Blattläuse habe ich leider nicht zu bieten. Aber tatsächlich, der erste Farn, den ich beim spazierengehen gefunden habe hat gleich fluoresziert.
Steffen
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures007/180652_53196878.jpg)
Confocale Aufnahme, Maximum-Intensity-Projektion von 120 Ebenen mit je 10 µm Abstand, im Original 2048x2048 pixel in xy, Kantenlänge 1.55 mm. Aufgenommen mit 10x, 0.3NA Objektiv, Anregung mit 405 nm. Die gezeigten Kanäle sind blau (410-490 nm), grün (491-555 nm) und rot (650-778 nm). Aufnahmedauer ca 10 min.
Liebe begeisterte Farnjäger,
noch ein Bild, ein Versuch auch die Sporen mit der UV-Fluoreszenz einzufangen.
(https://www.mikroskopie-forum.de/pictures004/180704_44673241.jpg)
Objektiv Nikon UV-F 40/1,30 Glyc. Anregung @365nm , LP 410nm , Canon 450D , Einbettung in reinem 99,9% Glycerin, Stack aus 50 Bilder mit HeliconFocus, Nachbearbeitung. Nur durch die hohe Apertur lassen sich vernünftige Bel.Zeiten erhalten. Allerdings kann jetzt die LED die volle Leistung abgeben.
Viel Spass
Peter
Wow, Peter, sieht (wieder) toll aus. Ästhetisch allemal besser als meins und als Wandschmuck unbedingt geeignet. Gold und Blau, werde ich mal probieren.
Steffen