Vielzelligkeit von Schimmelpilzen

[Spectrum]

Hallo Alexander,
Obwohl wir uns ja schonmal zu dem Thema ausgetauscht hatten, muss ich dich nochmal bezüglich der Präparation löchern:
Hast du das Präparat direkt nur auf einem Deckglas in einer feuchten Kammer wachsen lassen?
oder
Hast du einen Agar-Nährboden auf einen Objektträger aufgebracht, dann mit Deckglas abgedeckt und dann den Pilz in die dort befindlichen dünnen Schicht einwachsen lassen?
LG Holger

[Aljoscha]

Hallo Holger,

Ich habe Deckgläser mit einer dünnen Schicht Saubouraud-Agar bestrichen, beimpft und dann einige Tage in einer feuchten Kammer bei Raumtemperatur inkubiert. Anschließend fixiere ich die Proben in Methanol und färbe sie.

Viele Grüße

Alexander

[Spectrum]

Alles klar.
Ich hab mal (ich glaube im amerikanischen) Forum gelesen das dort jemand das Myzel in der dünnen Schicht zwischen Deckglas und Objekträger hat wachsen lassen. Entweder in einem Nährboden der gleich auch schon stark verdünntes Fluorochrom enthalten hat (Uvitex/ Calcofluor). Damit konnte man an den Wachstumsspitzen der Hyphen dann die Chitinbildung in vivo beobachten.
Alternativ kann der durchwachsene Objektträger mit der planen Nährbodenschicht auch schockgefrostet und abgesprengt werden. Anschließend dann fixiert und mit einem Farbstoff nach Wahl z.b. Dapi, Kongorot etc gefärbt werden. Dadurch erhält man dann wohl ein besonders dichtes und vor allem planes Präparat.
(Nur als weitere Anregung für deine hochinteressante Versuche gedacht... Ich finde deine Aufnahmen jetzt schon super, und wünsche mir gerade viel mehr "Mikroskopzeit", damit ich das auch einmal ausprobieren kann)
Grüße Holger

[Aljoscha]

Hallo Holger,

Mit meiner Methode kriege ich hinreichend plane Präparate. Einklemmen zwischen Deckglas und Objektträger reduziert die Erfolgsquote erheblich. Der Schimmel wächst nicht so gerne ohne Luft. Das Problem hatte ich mit der Methode, Deckgläser auf den Agar zu legen. Das hat immer wieder mal gut funktioniert aber oft auch nicht, hängt unter anderem von der konkreten Spezies ab.

Viele Grüße

Alexander

[Spectrum]

Alles klar.
Wird Zeit für mich auch mal wieder die Farb LED's abzuschalten...
Bis denn Holger

[Aljoscha]

Hallo,

Ich habe nochmal versucht die Struktur des Schimmels mit den Zellkernen etwas besser herauszuarbeiten.

Hoechst 33528, UV-Anregung, Zeiss Filtersatz 01, Neufluar 40x/0.75.

Viele Grüße

Alexander

[Daniel Scheibenstock]

WOW    

[Jürgen Boschert]

Hallo Alexander,

ein Augenöffner und -schmaus!

[K. B.]

Hallo Alexander,

das Bild sieht fantastisch aus, besonders die Konidienträger werden wunderbar hervorgehoben!

Viele Grüße
Kay

[anne]

Hallo Alexander,
große KLasse!
Bin begeistert!
lG
Anne

[beamish]

Hallo Alexander, das sieht wirklich beeindruckend aus!
Pilzliche Zellwände lassen sich übrigens ganz gut mit Kongorot anfärben. Einfach in das Wasserpräparat auf dem Objektträger seitlich am Deckglasrand etwas Kongorotlösung aufbringen und an der gegenüberliegenden Seite mit einem Stückchen Zellstoff (Tempo etc.) durchs Präparat saugen.

Grüße
Martin

[Spectrum]

Super!