Chitin macht Probleme beim Schneiden...was nun?!...Bitte Hilfe!

[bbb]

Hallo MIkroskopiker!

Ich habe mal eine Frage, da Chitin kaum Calciumcarbonat enthält, wie kann ich es dann auflösen und Insekten nach dem Einbetten besser schneiden zu können?
Da würde ja EDTA und anderen nicht viel helfen, oder?
Ich bekomme aus der Zoologie bald mehrere Tiere die eine Chitinhülle besitzen (Stabheuschrecken, Skorpione, Garnelen und mehr) und würde diese natürlich gern schneiden.
Allerdings habe ich durch frühere Erfahrungen an geschnittenen Käfern das Chitin sich ungern schneiden lässt.

Ich hoffe jemand kann mir helfen

[Jürgen H.]

Lieber Max,

Ich freue mich, dass ich dann bald Bilder aus der Insektenhistologie von Dir sehen kann! Ich hoffe, Du bist frustresitent, denn wenn Du Insekten schneiden willst, bekomme ich nicht nur einen Kollegen sondern auch einen Leidensgenossen.

Folgende Tipps aus meiner Sammlung, die sich vielleicht als hilfreich erweisen könnten:

Tiere möglichst unmittelbar nach einer  Häutung verwenden.

Eintrittspforten für das Fixativ und die folgenden Behandlungen schaffen und z.B. bei der Stabheuschrecke nur Teile gesondert fixieren und einbetten: Kopf Teile des Thorax oder Teile des Abdomens.

Ein gut penetrierendes Fixativ verwenden.

Eine absolut zuverlässige Entwässerung sicherstellen.

Ich verwende Isopropanol(Keinen ETOH) und dann Butyl N als Intermedium, um jede Härtung möglichst zu vermeiden.

Kalt schneiden!

Es gibt im Netz verschiedene Angaben zum Vermeiden von Problemen mit Chitin: Mollifex, Doppelte Einbettung über Celloidin, Behandlung mit Schwefelsäure etc....Nun ja.

Das Sicherste ist wohl, über einen Kunststoff zu gehen. Das erfordert aber ein völlig anderes Equipment.

Viel Erfolg!

Jürgen

[bbb]

Ja ich will es mal versuchen, mich interessieren vor allem die Giftdrüsen des Skorpions
Also ich werde sie in alkoholischer Bouin-Lösung fixieren und über Isopropanol einbetten.
Ich lasse sie lange im Bouin liegen das, das Calciumcarbonat entzogen wird.
Meine Blöcke schneide ich immer kalt, ich kühle sie in einem kleinen Gefrierschrank auf minus 15 Grad das hat sich immer bewährt.
Ich hoffe das klappt alles wegen dem Chitin.
Bist du eigentlich ein Thüringer?
Ich suche hier im Forum auch Mitglieder mit denen man sich mal persöhnlich treffen und austauschen kann.

[JB]

Hallo,

Jürgen, haben Sie jemals versucht das Problem mit der Pilz-Chitinase anzugehen? Wie gesagt, selbst versucht habe ich es auch noch nicht.
Antwort #6:  http://www.mikroskopie-forum.de/index.php?topic=12718.5

Beste Gruesse,

Jon

[Jürgen H.]

Lieber Max,

Bist du eigentlich ein Thüringer?

Nein, Rheinländer....

Lieber Jon,

Mit Chitinase habe ich auch noch keine Erfahrungen. Ich erinnere mich an Deinen Tipp und hatte auch schon ein paar Champignons in Salz eingelegt und dann irgendwie die Sache vergessen, als ich mit anderen Dingen heftig beschäftigt war. Ein Versuch wäre also noch zu starten.

Schöne Grüße

Jürgen

[bbb]

Das mit der Chitinase muss ich auch mal versuchen, klingt sehr interessant.
Ich werde 1 Skorpion in Chitinase einlegen, 1 in EDTA und einen unbehandelt.
Mal sehen wie die Unterschiede beim schneiden und färben sind.

[abbeköhl]

Guten Morgen Max,

Herzlich willkommen im Forum.

Ich hätte da etwas für dich im Zusammenhang mit ""Chitinhaltigen Proben präparieren"".
Vielleicht kannst du etwas damit anfangen. 

Aus der Praxis des Käfersammlers - Das Herstellen mikroskopischer Präparate. DR. RUDOLF F. HEBERDEY 1938 (PDF)
Aus der Praxis des Käfersammlers - Das Herstellen mikroskopischer Präparate. Die Konservierung. DR. RUDOLF F. HEBERDEY 1938 (PDF)
Die Käfer Mitteleuropas, Sammeln, Präparieren etc. (21,7MB, PDF)
Über Präparieren von Strepsipteren - Teil1 (PDF)
Über Präparieren von Strepsipteren - Teil2, Die Borkenkäfer des baltischen Bernsteins (20,9MB, PDF)
Über die Mallophagen, Präparieren, Untersuchen etc. Franz Schömmer 1913 (PDF)
Die Rezeptur der Hummerschale, Interessantes über Chitin unter dem Mikroskop (PDF)
Arbeitsmethoden der entomologischen Anatomie und Histologie, Präparieren, Fixieren, Schneiden, Färben etc. (PDF)

Schöni Grüess us dä Schwyz, Reto B.

[bbb]

Hallo Reto,
die Links sind klasse die schaue ich mir gerade an.
Besonders der letzte zum PDF runterladen ist sehr gut.
Danke dafür