Flourezenz Filter (Einbau und andere Fragen)

SamuelReicher · März 25, 2026, 16:24:07 NACHMITTAGS

Hallo,

Also heute kam mein Würfel (Zeiss, 1046-281), er passt super in mein Axioplan 2.

Er sollte laut Verkäufer leer sein, nun das war er nicht. Es ist ein (Anregungsfilter?) Und ein Spiegel drin.

Ich habe keine Ahnung für welche Wellenlänge der ist nehme aber an er ist nutzlos ohne den passenden emmisionsfilter? Wenn ich gegen das licht durchschaue, macht das bild einen gräulichen Eindruck.

Ich würde gerne meine Chroma filter einbauen und dachte ich frage bevor ich herumschraube und was kaputt mache.Der durchmesser der Filter beträgt 25,1 mm, ich habe einen Reingelegt, hat gepasst aber er ist nicht eingerastet und ich wollte nicht mit kraft andrücken.

Würde mich über Antworten sehr freuen

SamuelReicher · März 25, 2026, 17:13:05 NACHMITTAGS

Ich glaube ich hab es hinbekommen. Es war eine Schraube. Meine Filter sind eingesetzt. Leider hatte ich nur einen Fixierungsring. Der obere Filter liegt nur auf.

Vieleicht weiß jemand warum 2 Stück eingesetzt waren? Hintereinander.

Den Spiegel hab ich drin gelassen und nicht durch meinen ersetzt.

Daniel Scheibenstock · März 25, 2026, 17:16:16 NACHMITTAGS

Hallo Samuel,

du musst den Spiegel auch tauschen .

Schau mal ob der graue ein Polfilter ist,

Lg Daniel

SamuelReicher · März 25, 2026, 17:23:14 NACHMITTAGS

Zitat von: Daniel Scheibenstock in März 25, 2026, 17:16:16 NACHMITTAGSHallo Samuel,

du musst den Spiegel auch tauschen .

Schau mal ob der graue ein Polfilter ist,

Lg Daniel

Verdammt

jetzt muss ich das ding doch aufschrauben

Erledigt. Der Spiegel hatte keine Beschriftung und war auf beiden seiten augenscheinlich identisch. Ich hoffe er ist richtig herum. Das sehe ich wenn die LED kommt.

Nein, war kein polfilter. Und der spiegel war ein normaler spiegel wie er im badezimmer hängt

K. B. · März 25, 2026, 17:36:31 NACHMITTAGS

Hallo Samuel,

mehrere Filter in Kombination kann man nehmen wenn man schmalere Banden benötigt, das ist häufig günstiger als ein stark optimierter filter.
Bei manchen Filterkombinationen reicht auch schon der dichrotische Spiegel um das Anregungslicht abzutrennen, dann ist ein extra Filter nicht unbedingt nötig.

Wenn du mehr mit Filtern arbeiten möchtest, kann ich dir empfehlen ein günstiges Spektrometer zu kaufen, damit kann man unbekannte Filter überprüfen.
Z.B. solche hier:
https://de.aliexpress.com/item/1005008234440566.html?
https://de.aliexpress.com/item/1005009610503687.html?

Die sind nicht mega genau, reichen aber für das Überprüfen von Filtern und Lichtquellen/ LED's.

Viele Grüße
Kay

Peter_le · März 25, 2026, 20:09:26 NACHMITTAGS

Hallo Samuel,

Ist doch super wenn der nicht leer geliefert wurde und das für den Verkäufer OK ist

Was ich nicht super finde ist, dass du die jetzt möglicherweise nicht die beste Umgangsart erfahren habe $:-\$

Grüße
Peter

SamuelReicher · März 25, 2026, 20:24:09 NACHMITTAGS

Zitat von: Peter_le in März 25, 2026, 20:09:26 NACHMITTAGSHallo Samuel,

Ist doch super wenn der nicht leer geliefert wurde und das für den Verkäufer OK ist

Was ich nicht super finde ist, dass du die jetzt möglicherweise nicht die beste Umgangsart erfahren habe $:-\$

Grüße
Peter

Naja schon, aber ich wüsste schon gerne was ich da für welche habe. Werde das mit dem spektrometer probieren, ins photometer vom labor bekomme ich sie leider nicht rein.

SamuelReicher · März 26, 2026, 08:23:30 VORMITTAG

Oh, ich werde ein Photometer nutzen um herauszufinden was ich da habe

Sie passen in die küvette

Peter_le · März 26, 2026, 09:13:50 VORMITTAG

Zitat von: SamuelReicher in März 26, 2026, 08:23:30 VORMITTAGSie passen in die küvettr

Also doch?
Ich wollte vorschlagen, dass man sich sicherlich eine Halterung bauen kann und zumindest in einem Photometer für mehrere Proben der Wechsler sicherlich herausnehmbar ist und genug Platz sein sollte.

@Kay die Links sind auch für andere interessant. Ich baue trotzdem eher mal ein Gerät Marke Eigenbau.

Grüße
Peter

SamuelReicher · März 26, 2026, 19:41:14 NACHMITTAGS

Zitat von: Peter_le in März 26, 2026, 09:13:50 VORMITTAG
Zitat von: SamuelReicher in März 26, 2026, 08:23:30 VORMITTAGSie passen in die küvettr

Also doch?
Ich wollte vorschlagen, dass man sich sicherlich eine Halterung bauen kann und zumindest in einem Photometer für mehrere Proben der Wechsler sicherlich herausnehmbar ist und genug Platz sein sollte.

@Kay die Links sind auch für andere interessant. Ich baue trotzdem eher mal ein Gerät Marke Eigenbau.

Grüße
Peter

Ja, hab sie schon eingepackt damit ich sie nicht vergesse. Ich erwäge zu fragen ob ich das Photometer haben darf. Im labor haben sie 5 neue.

Kennst du dich mit Chroma filtern aus? Die Floureszenz hat heute nicht funktioniert. Strahlengang passt, es kommt blaues licht durchs objektiv, wenn auch nur wenig.

Ich bin auf fehlersuche. Auf den Filtern sind pfeile, ich habe sie in richtung des lichts eingesetzt. Also Licht -》 anregungsfilter mit pfeil in richtung spiegel. Den emissionsfilter ^ pfeil nach oben richtung okular. Passt das?

SamuelReicher · März 26, 2026, 20:46:43 NACHMITTAGS

Es lebt

Die ersten (grottigen) Bilder möchte ich niemandem vorenthalten.

Der Farbstoff war viel zu konzentriert und das Präperat auf die schnelle vorbereitet

Epithelzellen, mit acridinorange.

40 mal Fluar 1,3 Öl

Peter_le · März 27, 2026, 00:11:14 VORMITTAG

Hallo Samuel,

für die Fluoreszenzmikroskopie empfehle ich Literaturarbeit.

- Prinzipieller Aufbau der Auflichtfl.. Für den Anfang zum Einlesen könnte Durchlicht-Fl. didaktisch nützlich sein.

Was sind:
- Anregungsfilter
- Strahlteiler
- Emissionsfilter

Wie werden Filter bezeichnet und charakterisiert?:
- Kurzpass
- Langpass
- Bandbass

Leider keine Liste auf Vollständigkeit.

Zum Glück ist zur Fluoreszenzmikroskopie reichlich, auch aktuelles Material vorhanden. Kurz quergelesen:
https://www.edmundoptics.de/knowledge-center/application-notes/optics/fluorophores-and-optical-filters-for-fluorescence-microscopy/

Die eingebauten Filter und Filterwürfel solltest du auf jeden Fall notieren.
Ebenso welche Farben betroffen sind.
Bei einem guten Photometer kannst du ja die Kurve ausmessen, sehr nützlich

Viel Glück, vielleicht kriegst du ja ein gebrauchtes

Mit geschickter Spektrums-Wahl der LED lassen sich Anregungsfilter auch vermeiden.

Ich sehe jedenfalls ein Bild und Epithelzellen!

Grüße
Peter

SamuelReicher · März 27, 2026, 14:50:26 NACHMITTAGS

Also, die Filter die drin waren, Absorbieren im UV bereich. Im Vis bereich von 400 bis 580 gibt es keine nennenswerte Extinktion. Weiter hab ich gar nicht gemessen.

Spectrum · März 27, 2026, 15:23:54 NACHMITTAGS

Hallo Samuel,
Es sieht so aus als hättest du da zwei ND Filter (Graufilter).
Wenn der verbaute Spiegel ein einfacher Teilerspiegel ist, kann man einen solchen Würfel für Hellfeld Auflicht nutzen.

Deine ersten Aufnahmen mit Acridinorange sind zwar extrem überfärbt, aber dein neuer Filtersatz scheint grundsätzlich sehr gut zu Acridinorange zu passen.👍
Ich nutze Acridinorange als 0,002%ige Stammlösung und verdünnen diese dann häufig noch um den Faktor 10-200.
Das die Interferenzfilter eine Vorder- und Rückseite haben, hast du beim Einbau beachtet?
Grüße Holger
*Nachtrag:
Hatte deinen Post mit der Beschreibung wie du die Filter eingebaut hast, überlesen.
Ja, für Chroma Filter passt das genauso so, wie du es gemacht hast.
Bei anderen Firmen ist es genau umgekehrt mit den Pfeilen.
Grundsätzlich sollte die dielektrisch bedampfte Seite immer in die Richtung zeigen aus der das Licht kommt.

SamuelReicher · März 27, 2026, 15:53:26 NACHMITTAGS

Zitat von: Spectrum in März 27, 2026, 15:23:54 NACHMITTAGSHallo Samuel,
Es sieht so aus als hättest du da zwei ND Filter (Graufilter).
Wenn der verbaute Spiegel ein einfacher Teilerspiegel ist, kann man einen solchen Würfel für Hellfeld Auflicht nutzen.

Deine ersten Aufnahmen mit Acridinorange sind zwar extrem überfärbt, aber dein neuer Filtersatz scheint grundsätzlich sehr gut zu Acridinorange zu passen.👍
Ich hab nutze Acridinorange als 0,002%ige Stammlösung und verdünnen diese dann häufig noch um den Faktor 10-200.
Das due Interferenzfilter eine Vorder und Rückseite haben, hast du beim Einbau beachtet?
Grüße Holger

Also, das wäre cool. Der spiegel sieht aus wie ein normaler spiegel. Ich wäre auf der suche nach einem für normales auflicht. Wie erkenne ich ob es ein Teilerspiegel ist?

Ich hab das acridinorange heute 1 zu 10000 verdünnt und teste nacher aus ob das reicht.

Ja hab ich beim einbau beachtet