Fixierung von Salzpfannenbakter

[3nzo]

Grüße an alle Teilnehmer des Forums.
Ich bin auf der Suche nach einer Anleitung, um eine Zubereitung von Salzpfannenbakterien vorzunehmen. Ich mache einen Abstrich auf den Objektträger der Kulturkochsalzlösung und gebe ihn über die Flamme. Es bildet sich ein Salzagglomerat, in das die meisten Bakterien aufgenommen werden und die beim nächsten Waschen verloren gehen.
Wenn ich die Kulturlösung verdünne, befürchte ich, dass die Bakterien durch Osmose explodieren. Hat jemand Erfahrung und können Sie mir Ratschläge geben, wie ich vorgehen soll?
Vielen Dank und beste Grüße.

Enzo

[Gerd Schmahl]

Hallo Enzo,
Versuch macht klug! Probiere es doch aus, ob sie explodieren oder versuche etwas anderes als Wasser, z.B. Immersionsöl.
LG Gerd

[Rene]

Fixation for LM, Enzo? Sorry, no direct experiece, but some thoughts: if you fix with Lugol, osmotic pressure should be no problem. I'm just not sure how you can adhere them well enough to the slide in order to wash away the salt? Or you could try and wash them via a millipore filter?

Best, René

[3nzo]

Danke für die Antworten.
Kennt jemand das Verfahren zur Gewinnung dauerhafter Präparate dieser Bakterien und Archaeen der Salinen ?
Herzliche Grüße.

Enzo

[bminer]

Zur Kultur sollte es jede Menge Informationen in frei zugänglichen wissenschaftlichen Artikeln oder auch bei den Stammsammlungen geben, es gibt auch komplette Handbücher wie

https://haloarchaea.com/wp-content/uploads/2018/10/Halohandbook_2009_v7.3mds.pdf

Ich würde jeweils nach den zu kultivierenden Spezies suchen.


Björn

[Aljoscha]

Hallo Enzo,

Nimm dir mal mehr Zeit und warte bis das Wasser ohne Erwärmung verdunstet. Auf diese Weise sollten mehr Bakterien direkt auf dem Objektträger sitzen und weniger im Salz eingeschlossen. Wenn er trocken ist, mit Hitze fixieren und dann vorsichtig waschen. Dafür statt Wasser auch mal Methanol probieren.

Viele Grüße

Alexander

[3nzo]

Danke an Björn, Alexander und alle für die Ratschläge.
Herzliche Grüße.

Enzo